SW1353 人軟骨肉瘤細(xì)胞 百歐博偉生物

SW1353 人軟骨肉瘤細(xì)胞 百歐博偉生物

細(xì)胞簡介

平臺編號：Bio-132137

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞信息：SW1353

產(chǎn)品簡稱：SW1353

中文名稱：(人軟骨肉瘤細(xì)胞)(STR鑒定正確)

細(xì)胞數(shù)量：1*10^6

組織來源：軟骨肉瘤

形態(tài)特征：成纖維樣

生長方式：貼壁生長

培養(yǎng)條件：Leibovitz'sL-15+10%FBS+1%P/S無二氧化碳培養(yǎng),氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%；溫度：37℃

換液頻率：--

傳代比例：1:2傳代，消化3-5分鐘，3天可長滿

凍存液配方：90%FBS+10%DMSO

安全性：BSL-1

供應(yīng)限制：僅供科研

運輸方式：常溫運輸（T25培養(yǎng)瓶）

用途：STR鑒定正確

注意事項：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）

SW1353(人軟骨肉瘤細(xì)胞）特點

1、細(xì)胞顆粒感較重

細(xì)胞傳代培養(yǎng)時細(xì)胞內(nèi)黑點及細(xì)胞外顆粒較多，建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞；

2、傳代、復(fù)蘇注意細(xì)胞狀態(tài)

細(xì)胞消化或者復(fù)蘇操作不當(dāng)容易導(dǎo)致細(xì)胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒，進(jìn)而影響活細(xì)胞狀態(tài)，注意消化或復(fù)蘇過程盡量輕柔，嚴(yán)格控制消化時間和復(fù)蘇操作規(guī)范，傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細(xì)胞，建議換液一次去除死亡細(xì)胞。

細(xì)胞收貨攻略

（一）常溫細(xì)胞

1、T25瓶收貨后，拆開外包裝，用75%消毒T25瓶表面，放37℃培養(yǎng)箱靜置2-4h；

2、吸走大部分培養(yǎng)基并留10-12 ml，顯微鏡下拍照保存細(xì)胞狀態(tài)照片，觀察細(xì)胞密度，若細(xì)胞密度大于80%即可按比例傳代（傳代比例建議1：2），若細(xì)胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上再進(jìn)行傳代培養(yǎng)；

（二）凍存細(xì)胞

1、細(xì)胞收貨后盡快開箱檢查，若干冰充足可以取出細(xì)胞迅速置于-80℃冰箱（2-3天內(nèi)復(fù)蘇）短期保存或液氮中長期保存，若干冰揮發(fā)建議立即復(fù)蘇細(xì)胞并聯(lián)系銷售人員解決；

2、凍存細(xì)胞建議盡快復(fù)蘇一管培養(yǎng)檢查，以免超出售后期，復(fù)蘇步驟參考復(fù)蘇攻略；

3、復(fù)蘇一管細(xì)胞出現(xiàn)異常及時聯(lián)系銷售人員，在專業(yè)技術(shù)支持的指導(dǎo)下進(jìn)行下一步操作；

TIPS：

1、細(xì)胞收貨出現(xiàn)漏液、培養(yǎng)瓶破損、干冰揮發(fā)等異常情況時，及時拍照聯(lián)系銷售人員；

2、該細(xì)胞貼壁生長，一般T25瓶運輸過程中較少出現(xiàn)大量細(xì)胞脫落并聚團(tuán)的情況，少量細(xì)胞脫落是正常狀態(tài)，不影響細(xì)胞生長，按正常操作步驟繼續(xù)培養(yǎng)即可。

3、尚恩生物T25瓶發(fā)貨的細(xì)胞內(nèi)含對應(yīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基，可以收集原裝培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基經(jīng)1500rpm離心5min后，取上清于4℃保存用于后續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)；

細(xì)胞凍存攻略

凍存步驟

1、先將細(xì)胞按傳代步驟消化、離心，至傳代步驟4，棄細(xì)胞上清，獲得細(xì)胞沉淀；

2、加入適量預(yù)先配好的程序性凍存液輕輕重懸細(xì)胞，并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至做好標(biāo)記的凍存管中；

3、將凍存管放入程序性凍存盒，放入-80℃冰箱過夜；

4、轉(zhuǎn)移細(xì)胞至液氮保存并登記細(xì)胞保存位置，液氮保存24h后建議復(fù)蘇一管檢測凍存細(xì)胞的活性，若活性合格即可長期保存，若低于80%建議重新凍存；

TIPS：

1、檢測凍存細(xì)胞活性結(jié)果未合格前，培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞建議繼續(xù)培養(yǎng)直至確認(rèn)凍存合格方可視需要丟棄；

2、程序性凍存液需要配合程序性凍存盒使用，若使用非程序凍存液可以按產(chǎn)品說明書處理降溫過程；

3、T25培養(yǎng)瓶長滿通?？梢詢龃?-3管，10cm皿長滿可以凍存3-4管；

細(xì)胞復(fù)蘇攻略

復(fù)蘇步驟

1、將所需的培養(yǎng)基放在培養(yǎng)箱預(yù)熱30min后開始復(fù)蘇；

2、準(zhǔn)備37度溫水，將細(xì)胞從液氮罐取中出，觀察管內(nèi)無液氮的情況下，捏住管蓋，將細(xì)胞凍存部分浸入溫水輕輕搖晃，融化至米粒大小冰塊，終止水浴；

3、將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心1-2min，不同離心機(jī)具體轉(zhuǎn)速會有差異；

4、離心完成后，棄凍存液，用剛才預(yù)熱的培養(yǎng)基緩慢加入凍存管，并輕柔重懸細(xì)胞后接種至T25或者10cm皿中。

TIPS：

1、凍存管在液氮長期保存過程中難免滲入液氮，取出細(xì)胞時震動不要過大，水浴前一定要觀察管內(nèi)是否存在液氮，若有液氮建議靜置一會待液氮蒸發(fā)后再水??；

2、水浴時可以使用一次性PE手套包住凍存管避免直接接觸水源，可以降低管蓋縫隙滲入水導(dǎo)致污染的概率；

3、水浴至剩米粒大小時及時終止水浴，避免過度水浴或水浴時間不足；

4、建議水浴完成后直接在離心管內(nèi)離心細(xì)胞，避免再次轉(zhuǎn)移細(xì)胞；

5、復(fù)蘇后的細(xì)胞比較脆弱，吹打和轉(zhuǎn)移細(xì)胞時盡量輕柔，復(fù)蘇24h后換液去除死亡細(xì)胞；

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