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          豬delta冠狀病毒N蛋白,豬德爾塔冠狀病毒蛋白(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)原核表達(dá)

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          更新時間:2024-12-19 15:37:03瀏覽次數(shù):47次

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          豬delta冠狀病毒N蛋白,豬德爾塔冠狀病毒蛋白(Porcinedeltacoronavirus,PDCoV)豬delta冠狀病毒N蛋白二類傳染病,是一種新型豬腸道冠狀病毒,可引起5-15日齡哺乳仔豬腹瀉和嘔吐,迅速脫水,衰竭而亡,發(fā)病率和死亡率高達(dá)50%-99%,生長豬、成年豬及生產(chǎn)母豬發(fā)病輕微,可不治而愈

            豬delta冠狀病毒N蛋白,豬德爾塔冠狀病毒蛋白(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)

            豬delta冠狀病毒N蛋白二類傳染病,是一種新型豬腸道冠狀病毒,可引起5-15日齡哺乳仔豬腹瀉和嘔吐,迅速脫水,衰竭而亡,發(fā)病率和死亡率高達(dá)50%-99%,生長豬、成年豬及生產(chǎn)母豬發(fā)病輕微,可不治而愈。

            豬delta冠狀病毒(Porcine Deltacoronavirus, PDCoV)作為近年來新發(fā)現(xiàn)的一種豬腸道冠狀病毒,其研究日益受到重視。該病毒主要引起仔豬的嘔吐、脫水和水樣腹瀉,對養(yǎng)豬業(yè)構(gòu)成了重大威脅。在眾多PDCoV的結(jié)構(gòu)蛋白中,N蛋白(Nucleocapsid Protein)因其相對保守性和良好的免疫原性,成為了研究熱點之一。本文將深入探討PDCoV N蛋白的特性、表達(dá)、功能及其在診斷與防控中的應(yīng)用。

            PDCoV N蛋白的特性
            PDCoV的N蛋白是病毒核衣殼的重要組成部分,它不僅在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,還是誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生免疫反應(yīng)的重要靶標(biāo)。N蛋白在不同毒株間表現(xiàn)出高度的保守性,這意味著基于N蛋白的檢測方法具有廣泛的適用性。此外,N蛋白在感染細(xì)胞內(nèi)含量豐富,易于檢測和純化,為相關(guān)研究提供了便利。

            N蛋白的表達(dá)與純化
            為了深入研究PDCoV N蛋白,科研人員通常采用基因工程技術(shù)進(jìn)行N蛋白的表達(dá)與純化。例如,通過RT-PCR擴(kuò)增PDCoV N基因,并克隆至原核表達(dá)載體(如pColdI)中,在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)。在低溫(如16℃)條件下,通過IPTG誘導(dǎo),可以獲得大量可溶性的重組N蛋白。隨后,利用SDS-PAGE電泳和Western blot等方法對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行鑒定和純化,確保獲得高純度的N蛋白用于后續(xù)研究。

            N蛋白的免疫原性
            PDCoV N蛋白具有良好的免疫原性,能夠刺激宿主產(chǎn)生特異性抗體。這些抗體在病毒感染的診斷中具有重要意義。通過免疫小鼠等實驗動物,可以獲得針對PDCoV N蛋白的單克隆抗體(mAb)。這些單克隆抗體不僅具有高特異性和高靈敏度,還能夠用于建立快速、準(zhǔn)確的診斷方法,如ELISA和IFA等。
            基于N蛋白的診斷方法
            基于PDCoV N蛋白的診斷方法主要包括血清學(xué)檢測和分子生物學(xué)檢測兩大類。血清學(xué)檢測主要利用N蛋白特異性抗體檢測感染動物血清中的病毒抗體,如ELISA和免疫熒光抗體試驗(IFA)。這些方法具有操作簡便、結(jié)果直觀等優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于PDCoV的流行病學(xué)調(diào)查和疫情監(jiān)測。分子生物學(xué)檢測則主要通過檢測病毒核酸(如RNA)來進(jìn)行診斷,如RT-PCR和實時熒光定量PCR(qPCR)等。這些方法具有高度的特異性和敏感性,能夠早期發(fā)現(xiàn)病毒感染,為疫情防控提供重要依據(jù)。
            N蛋白在疫苗研發(fā)中的潛力
            鑒于PDCoV N蛋白的免疫原性和保守性,它在疫苗研發(fā)中展現(xiàn)出巨大的潛力。通過構(gòu)建基于N蛋白的亞單位疫苗或基因工程疫苗,可以誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng),從而有效預(yù)防PDCoV感染。此外,N蛋白還可以作為診斷試劑的靶標(biāo),用于評估疫苗免疫效果和監(jiān)測疫苗接種后的抗體水平。

            表達(dá)載體: 桿狀病毒載體 
            蛋白純度: 大于95%(SDS-PAGE電泳)
            品牌:PhyCell/費雪
            規(guī)格:0.1mg,0.5mg,1mg
            該抗原可應(yīng)用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測。
            蛋白載體:牛血清白蛋白/卵清白蛋白/匙孔血藍(lán)蛋白BSA/OVA/KLH
            物理性狀:液體,避免反復(fù)凍融
            來 源:Balb/c 小鼠
            免疫層析效價: 1:40以上,偶聯(lián)比大于1:60
            蛋白濃度:>1mg/ml,具體視批次而定
            緩沖液:0.01M PBS PH7.4無防腐劑
            儲存條件:-20℃以下
            穩(wěn) 定 性: 凍融一次復(fù)檢合格,有效期三年
            本產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類、治療或診斷應(yīng)用。

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