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產(chǎn)品說(shuō)明：
匯智泰康公司的沙門氏菌LAMP檢測(cè)試劑盒，采用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增結(jié)合鈣黃綠素顯色技術(shù)，適用于食品及環(huán)境中沙門氏菌的快速檢測(cè)。
本產(chǎn)品具有以下特點(diǎn)：
- 簡(jiǎn)單快速，只需在反應(yīng)管中加入待測(cè)DNA模版，60-65℃恒溫反應(yīng)60min即可肉眼觀察結(jié)果，不需要特殊儀器。
- 可用于檢測(cè)食品樣本前增菌液或細(xì)菌純培養(yǎng)物（如：菌落）。
- 不含有任何有毒的試劑。
產(chǎn)品組成（24次/包裝）
組成（24個(gè)反應(yīng)） | 數(shù)量（管） | 規(guī)格 |
DNA提取液A | 2 | 1.5mL/管 |
DNA提取液B | 1 | 0.6 mL/管 |
LAMP反應(yīng)管 | 24 | 23 μL反應(yīng)液+30 μL保護(hù)液/管 |
陽(yáng)性對(duì)照 | 1 | 50 μL/管 |
運(yùn)輸及保存條件
干冰運(yùn)輸。-20oC條件下保存6個(gè)月。避免反復(fù)凍融。
使用說(shuō)明
- 模板制備
食品樣本前增菌液：吸取標(biāo)準(zhǔn)方法培養(yǎng)的食品樣本前增菌液200 μL加入1.5 mL離心管中，10 000 r/min離心2 min，棄上清。加入100
- B，混勻后離心，上清液即為DNA模板。制備的DNA樣品-20oC可長(zhǎng)期保存。
- 純細(xì)菌培養(yǎng)物：對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)方法分離到的疑似菌落，可直接挑取疑似菌落，按a中步驟，加入DNA提取液A和B制備DNA模板
- LAMP檢測(cè)
- 取出n個(gè)LAMP反應(yīng)管（n=待測(cè)樣本數(shù)+陽(yáng)性對(duì)照+陰性對(duì)照）于冰上融化并短暫離心；
- 向上述反應(yīng)管加入陰性對(duì)照、待測(cè)樣品或陽(yáng)性對(duì)照DNA樣本各2 μL。
注意：加樣時(shí)槍頭要穿過(guò)保護(hù)層加至反應(yīng)液層，蓋緊管蓋并做好標(biāo)記。由于LAMP反應(yīng)非常靈敏，建議使用帶濾芯的槍頭，并在生物安全柜中操作，避免可能出現(xiàn)的污染。
- 64oC恒溫反應(yīng)60 min。
- 80oC加熱10 min終止反應(yīng)。
結(jié)果判斷
- 肉眼或紫外燈下觀察：陰性對(duì)照管，橙色澄清；陽(yáng)性對(duì)照，綠色渾濁。
若待測(cè)樣品管中液體呈橙色澄清，則可初步判斷待測(cè)樣品中不含沙門氏菌；若待測(cè)樣品管中液體呈綠色渾濁，則可初步判斷待測(cè)樣品中含沙門氏菌；
圖注 1：陰性對(duì)照
2：陽(yáng)性對(duì)照
注意事項(xiàng)
- 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前對(duì)工作臺(tái)進(jìn)行紫外照射，并使用1%次氯酸鈉或75%酒精清理工作臺(tái)面。需定期按上述要求對(duì)各實(shí)驗(yàn)區(qū)域進(jìn)行清理。
- 實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格分區(qū)，各區(qū)物品，嚴(yán)禁交叉使用。
a. 待測(cè)樣品模板制備區(qū)
b. 反應(yīng)體系配制區(qū)
c. 反應(yīng)區(qū)及結(jié)果觀察區(qū)（建議在通風(fēng)櫥中進(jìn)行）
- 結(jié)果觀察時(shí)應(yīng)該小心謹(jǐn)慎，避免劇烈震蕩，反應(yīng)物外溢。
- 結(jié)果分析完成后反應(yīng)管應(yīng)密封于容器內(nèi)，丟棄于地點(diǎn)；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的廢棄物及一次性耗材均需*滅菌后方能丟棄。
