VSMC細(xì)胞(大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)
細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明:
- 拿到細(xì)胞后,先用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶外部,再在顯微鏡下觀(guān)察,看細(xì)胞是否懸浮,如果懸浮,吸出培養(yǎng)基,放入離心管,離心,倒掉上層培養(yǎng)基,加入5ml 新的DMEM 高糖培養(yǎng)基(+10%FBS),重懸,放入培養(yǎng)瓶,再放進(jìn)37℃,5%CO2 的培養(yǎng)箱中。
- 如果細(xì)胞正常貼壁,先吸出一部分培養(yǎng)基,放入溫箱中穩(wěn)定一段時(shí)間,再根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行處理。 傳代:先倒掉舊的培養(yǎng)基,然后用D-hank’s緩沖液洗兩遍,再加1ml 0.25%的胰蛋白酶消化液,在顯微鏡下觀(guān)察,等到細(xì)胞*脫落下來(lái),加5ml新的培養(yǎng)基終止消化,用移液管吹散,根據(jù)細(xì)胞量在細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)留下一部分細(xì)胞,其他吸出去,然后在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加滿(mǎn)5ml培養(yǎng)基。再放到37℃,5%CO2 的培養(yǎng)箱中。
換液:用D-hank’s緩沖液洗一遍,再加入新的5ml培養(yǎng)基,在放入37℃,5%CO2 的培養(yǎng)箱中。
注意:上述處理細(xì)胞的步驟都要在潔凈臺(tái)里面操作。
胎牛血清的處理:
沒(méi)有滅活的血清中含有補(bǔ)體成分,需要將血清在60℃條件下滅活30 min。在水浴鍋內(nèi)進(jìn)行,滅活的過(guò)程中,要不停的搖晃,是受熱均勻,防止沉淀析出來(lái)。滅活后的胎牛血清分裝后放置-20℃,分裝的目的是為了防止血清的反復(fù)凍融。
VSMC細(xì)胞(大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) 庫(kù)存狀態(tài):凍存現(xiàn)貨!復(fù)蘇周期1-2周!
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