H446（人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞）  慧穎生物現(xiàn)貨！訂購：/

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 的凍存
細(xì)胞凍存的原則是要逐步緩慢降溫，以避免細(xì)胞內(nèi)部形成冰晶對(duì)細(xì)胞造成傷害。
1) 貼壁細(xì)胞經(jīng)消化、離心收集，懸浮細(xì)胞經(jīng)離心收集；
2) 大約10⁶個(gè)細(xì)胞加入1ml凍存液（細(xì)胞培養(yǎng)液和10%DMSO），用吸管吹打，使細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液；
3) 加入到凍存管中。如用1.8ml的凍存管，每管不要加入超過1.5ml的細(xì)胞懸液；
4) 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞名稱及凍存日期；
5) 用厚布或衛(wèi)生紙包裹凍存管，置于4℃半小時(shí)，然后置于-20℃兩小時(shí)，再置于-40℃兩小時(shí)，然后置于液氮上方置夜；第二天將細(xì)胞置于液氮中；如果僅想提取細(xì)胞內(nèi)的東西可以直接放在-20度的冰箱中。
6) 記下凍存管存放的位置，作好凍存記錄。

小知識(shí)：如何選用培養(yǎng)基？
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，各種目的無血清培養(yǎng)的*是AIM V培養(yǎng)基（SFM）。在開始進(jìn)行新的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，可以參考下表所列的條件：
細(xì)胞系 細(xì)胞類型 種 組織 推薦使用的培養(yǎng)基
293 成纖維細(xì)胞 人 胚胎腎 MEM, 10% 熱滅活馬血清
3T6 成纖維細(xì)胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清
A549 上皮細(xì)胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清
A9 成纖維細(xì)胞 小鼠 結(jié)締組織 DMEM, 10%胎牛血清
AtT-20 上皮細(xì)胞 小鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
BALB/3T3 成纖維細(xì)胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清
BHK-21 成纖維細(xì)胞 倉鼠 腎 GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
BHL-100 上皮細(xì)胞 人 乳房 McCoy'5A, 10% 胎牛血清
BT 成纖維細(xì)胞 牛 鼻甲骨細(xì)胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA
Caco-2 上皮細(xì)胞 人 結(jié)腸腺癌 MEM, 20% 胎牛血清 和NEAA
Chang 上皮細(xì)胞 人 肝臟 BME, 10% 小牛血清
CHO-K1 上皮細(xì)胞 倉鼠 卵巢 F-12, 10% 胎牛血清
Clone 9 上皮細(xì)胞 大鼠 肝臟 F-12K, 10% 胎牛血清
Clone M-3 上皮細(xì)胞 小鼠 黑素瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
COS-1 成纖維細(xì)胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清
COS-3 成纖維細(xì)胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清
COS-7 成纖維細(xì)胞 猴 腎 DMEM, 10% 胎牛血清
CRFK 上皮細(xì)胞 貓 腎 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
CV-1 成纖維細(xì)胞 猴 腎 MEM, 10% 胎牛血清
D-17 上皮細(xì)胞 狗 骨肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
Daudi 成淋巴細(xì)胞 人 淋巴瘤病人血液 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
GH1 上皮細(xì)胞 大鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
GH3 上皮細(xì)胞 大鼠 垂體腫瘤 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
H9 成淋巴細(xì)胞 人 T細(xì)胞淋巴瘤 RPMI-1640, 20% 胎牛血清
HaK 上皮細(xì)胞 倉鼠 腎 BME, 10% 小牛血清
HCT-15 上皮細(xì)胞 人 結(jié)腸直腸腺癌 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
HeLa 上皮細(xì)胞 人 子宮頸癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA (in suspension, S-MEM)
HEp-2 上皮細(xì)胞 人 喉 癌 MEM, 10% 胎牛血清
HL-60 成淋巴細(xì)胞 人 早幼粒細(xì)胞白血病 RPMI-1640, 20% 胎牛血清
HT-1080 上皮細(xì)胞 人 纖維肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和NEAA
HT-29 上皮細(xì)胞 人 結(jié)腸腺癌 McCoy's 5A, 10% 胎牛血清
HUVEC 內(nèi)皮細(xì)胞 人 臍帶 F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素鹽 100 ug/ ml
I-10 上皮細(xì)胞 小鼠 睪丸癌 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清
IM-9 成淋巴細(xì)胞 人 骨髓瘤病人骨髓 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
JEG-2 上皮細(xì)胞 人 絨毛膜癌 MEM, 10% 胎牛血清
Jensen 成纖維細(xì)胞 大鼠 肉瘤 McCoy's 5A, 5% 胎牛血清
Jurkat 成淋巴細(xì)胞 人 淋巴瘤 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
K-562 成淋巴細(xì)胞 人 骨髓性的白血病 RPMI-1640, 10% 胎牛血清
KB 上皮細(xì)胞 人 口腔癌 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
KG-1 骨髓白細(xì)胞 人 紅白血病病人骨髓 IMDM, 20% 胎牛血清
L2 上皮細(xì)胞 大鼠 肺 F-12K, 10%胎牛血清
L6 大鼠 骨骼肌成肌細(xì)胞 DMEM, 10% 胎牛血清
LLC-WRC 256 上皮細(xì)胞 大鼠 癌 Medium 199, 5% 馬血清
McCoy 成纖維細(xì)胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清
MCF7 上皮細(xì)胞 人 乳腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰島素
WEHI-3b 類巨噬細(xì)胞 小鼠 骨髓單核細(xì)胞白血病 DMEM, 10% 胎牛血清
WI-38 上皮細(xì)胞 人 胚胎肺 BME, 10% 胎牛血清
WISH 上皮細(xì)胞 人 羊膜 BME, 10% 胎牛血清
WS1 人 胚胎皮膚 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
XC 上皮細(xì)胞 大鼠 肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
Y-1 上皮細(xì)胞 小鼠 腎上腺瘤 F-10, 15% 馬血清和 2.5% 胎牛血清