化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>40802ES03 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 Transfection Reagent
40802ES03 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 Transfection Reagent
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 40802ES03
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/9/4 16:59:00
- 訪問次數(shù) 2156
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企業(yè)簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進化技術(shù)為驅(qū)動，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè)，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽資質(zhì)
翌圣生物通過申請商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項（其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設(shè)計3項）和45項與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊商標(biāo)權(quán)37項以及4項境外注冊商標(biāo)，是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺
經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點實驗室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點研究基地的江南大學(xué)展開合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺——雙向分子酶理性設(shè)計與定向進化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運營的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運輸?shù)葘ιa(chǎn)線進行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實驗室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻力量。
分子生物學(xué)試劑，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40802ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent
脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） | *（元） |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES02 | 0.5ml | 4℃ | 738.00 | 488.00 |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES03 | 1 ml | 4℃ | 1308.00 | 868.00 |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES08 | 5×1ml | 4℃ | 4878.00 | 3248.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉(zhuǎn)染，對大多數(shù)真核細(xì)胞具有很高的轉(zhuǎn)染效率。其*的配方使其可直接加入培養(yǎng)基中，血清的存在不會影響轉(zhuǎn)染效率，這樣可以減少去除血清對細(xì)胞的損傷。轉(zhuǎn)染后不需要除去核酸-Hieff TransTM復(fù)合物或更換新鮮培養(yǎng)基，也可在4～6小時后除去。
Hieff TransTM以無菌的液體形式提供。通常情況下對于 24 孔板轉(zhuǎn)染，每次用1.5μl左右，則1ml Hieff TransTM約可做660 次轉(zhuǎn)染；對于6孔板，每次用6μl左右，則1ml Hieff TransTM約可做160 次轉(zhuǎn)染；
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產(chǎn)品4oC保存，一年有效。不可冷凍！
注意事項
1）Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑要求細(xì)胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳，這有助于減少陽離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性造成的影響；如果你研究的基因要求比較長的表達時間，比如細(xì)胞周期相關(guān)基因，或者細(xì)胞表面蛋白，選擇細(xì)胞鋪板密度要求較低的轉(zhuǎn)染試劑，不適合用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑。
2）Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基。但是，制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑，因為血清會影響復(fù)合物的形成。另外，要檢測所用的無血清培養(yǎng)基與脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑的相容性，已知CD293, SFMII, VP-SFM 就不相容。
3）轉(zhuǎn)染的時候培養(yǎng)基中不能添加抗生素。
4）使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率，質(zhì)粒中的內(nèi)毒素是轉(zhuǎn)染的大敵。
5）陽離子脂質(zhì)體應(yīng)該在4度保存，要注意避免多次反復(fù)長時間開蓋，因為可能會導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。
6）初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到zui大的轉(zhuǎn)染效率。DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3，比如24孔板內(nèi)接種0.5-2×105個細(xì)胞，使用0.5 µg DNA和1-1.5 µl 轉(zhuǎn)染試劑。通過調(diào)整DNA/Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑比例優(yōu)化轉(zhuǎn)染效率，保證細(xì)胞密度大于90%，DNA（μg）: Hieff TransTM（μl）比值在1：0.5-1：5。
操作流程（以24孔板為例，其他培養(yǎng)板加樣體積請參考表一）
【注】：轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實驗條件影響，建議初次使用時設(shè)置梯度進行優(yōu)化*使用量。
貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一天（20-24小時），胰|酶消化細(xì)胞并計數(shù)，細(xì)胞鋪板（不含抗生素），使其在轉(zhuǎn)染時密度為90-95%（0.5-2 × 105 cells/well for a 24-well plate）。
懸浮細(xì)胞：轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制DNA復(fù)合物之前，24孔板中細(xì)胞鋪板，每500µl生長培養(yǎng)基（不含抗生素）中加入4-8 × 105 cells。
1. 按照以下體系配制DNA-Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物：
1）對于每孔細(xì)胞，使用50μl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋0.5μg DNA?；靹颉?/span>
2）對于每孔細(xì)胞，使用50μl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋0.6-2.5 μl Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑。
Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑稀釋后室溫孵育5min（在30min內(nèi)同稀釋的DNA 混合，保溫時間過長會降低活性）。
【注意】：即使脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑使用OPTI-MEMⅠ稀釋，細(xì)胞也可以使用DMEM 培養(yǎng)。如果DMEM 作為脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑的稀釋液，必須在5min內(nèi)同稀釋的DNA混合。
2. 混合稀釋的DNA和稀釋的脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑（總體積100µl），輕輕混勻，并在室溫（15-25℃）孵育20min，使得DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物形成。此時溶液可能會混濁，但不會影響轉(zhuǎn)染。
【注意】：DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物室溫至少穩(wěn)定保存5h。
3. 直接將100µl DNA-Hieff TransTM復(fù)合物加入到細(xì)胞培養(yǎng)板每個孔中，搖動培養(yǎng)板，輕輕混勻。
【注意】：如果在無血清條件下轉(zhuǎn)染，使用含血清的正常生長培養(yǎng)基進行細(xì)胞鋪板。在加入復(fù)合物前移去生長培養(yǎng)基，替換為500µl無血清培養(yǎng)基。
4. 37℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24-48h，直至進行轉(zhuǎn)基因表達分析，無需去掉復(fù)合物或更換培養(yǎng)基。然而，可能有必要在4-6h后更換生長培養(yǎng)基，不會降低轉(zhuǎn)染活性。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株：轉(zhuǎn)染24h后，按照1：10或更高比例在細(xì)胞中加入新鮮生長培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染48h后加入篩選培養(yǎng)基。
懸浮細(xì)胞株：在細(xì)胞中加入DNA-Hieff TransTM復(fù)合物后，如果需要可以4h后加入PMA和/或PHA。對于Jurkat細(xì)胞，PHA和PMA的終濃度分別為1µg/ml和50ng/ml，可以提高CMV啟動子活性和基因表達。對于K562細(xì)胞，只加入PMA足以提高啟動子活性。
轉(zhuǎn)染體系的調(diào)整
對于不同的細(xì)胞培養(yǎng)板，Hieff TransTM脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑、DNA、細(xì)胞和培養(yǎng)基的使用量會有所不同，具體請參考下表（表一）。對于96 孔板培養(yǎng)，不需要提前一天進行細(xì)胞鋪板，可以直接在平板中制備復(fù)合物，然后將細(xì)胞懸浮液加入到復(fù)合物就可以了，這樣進一步減少了轉(zhuǎn)染時間。這種改進步驟已經(jīng)過293-H，293-F，COS-7L和CHO細(xì)胞的試驗，同傳統(tǒng)方法相比活性稍低?？旖莸牟襟E和蛋白表達細(xì)胞系的高效轉(zhuǎn)染使得脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑非常適用于96 孔板的高通量轉(zhuǎn)染，比如cDNA文庫的篩選和蛋白瞬時表達。
表一 在不同的培養(yǎng)容器中轉(zhuǎn)染，脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑，核酸，細(xì)胞和培養(yǎng)基的用量
Culture vessel | Surf. area per well1 | Shared reagents | DNA transfection | RNAi transfection | |||
Vol. of plating medium | Vol. of dilution medium2 | DNA | 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | RNA | 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | ||
96-well | 0.3 cm2 | 100 μl | 2×25 μl | 0.1 μg | 0.2-0.5 μl | 5 pmol | 0.25 μl |
24-well | 2 cm2 | 500 μl | 2×50 μl | 0.5 μg | 0.6-2.5 μl | 20 pmol | 1.0 μl |
12-well | 4 cm2 | 1 ml | 2×100 μl | 1 μg | 2-4.5 μl | 40 pmol | 2.0 μl |
6-well | 10 cm2 | 2 ml | 2×250 μl | 2-4 μg | 5-10 μl | 100 pmol | 5 μl |
60-mm | 20 cm2 | 5 ml | 2×0.5 ml | 4-8 μg | 10-20 μl | 200 pmol | 10 μl |
10-cm | 60 cm2 | 15 ml | 2×1.5 ml | 12-24μg | 30-60 μl | 600 pmol | 30 μl |
1 不同廠商提供的細(xì)胞培養(yǎng)板表面積可能有所不同；
2 稀釋DNA或RNAi所用的培養(yǎng)基體積。
【注】：該表使用量僅供參考，具體使用量還需根據(jù)細(xì)胞類型及其他實驗條件進行優(yōu)化。使用時DNA（μg）: Hieff TransTM（μl）比值保持在1:0.5-1:5。
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