Lncap(前列腺癌細(xì)胞)
- 公司名稱 齊一生物科技(上海)有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 齊一生物
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2017/7/12 15:33:17
- 訪問(wèn)次數(shù) 571
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細(xì)胞名稱 | 人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP |
形態(tài)特性 上皮樣;梭形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞由Horoszewicz JS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結(jié)細(xì)針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細(xì)胞的生長(zhǎng)和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細(xì)胞不形成均一的單層而是成簇生長(zhǎng),所以傳代的時(shí)候要反復(fù)吹打形成單個(gè)細(xì)胞;該細(xì)胞貼壁不牢,達(dá)不到匯合狀態(tài),而且會(huì)使培養(yǎng)基迅速變酸;傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時(shí)挪動(dòng)培養(yǎng)瓶,會(huì)使大部分細(xì)胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況,需要重新孵育24~48h使細(xì)胞重新貼壁,細(xì)胞貼壁后可更換培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;5~7天1次。
傳代情況 P50
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶
染色體 72~88,XY
使用權(quán)限 A類
人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP參考圖片:
人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP
傳代培養(yǎng)首先:
細(xì)胞復(fù)蘇:
1.應(yīng)遵守慢凍快融的原則.先將水溫鍋調(diào)至37-38度,取出凍存的細(xì)胞迅速放入后交細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化.
2.在無(wú)菌臺(tái)內(nèi)將*培養(yǎng)基加入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),然后用無(wú)菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞,置培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)輕輕搖晃,使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),24h后換液;也可復(fù)蘇當(dāng)時(shí)離心(1000rpm 5min左右)后,*培養(yǎng)基重懸培養(yǎng),適時(shí)換液。
細(xì)胞傳代:
1.貼壁細(xì)胞:
對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死細(xì)胞,50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約0.6ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)配制強(qiáng)度經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后收集離心(1000rpm 5min左右),新鮮培養(yǎng)基重懸沉淀,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn).
2.懸浮細(xì)胞:
一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度或需更換新培養(yǎng)基,可先離心(1000rpm,5min左右)后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng).
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