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        1. 產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


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          小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF) ELISA試劑盒

          來(lái)源:齊一生物科技(上海)有限公司   2016年02月18日 10:30  

          小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF)  ELISA試劑盒

          英文名稱(chēng):mouse Insulin Promoter Factor 1 (IPF) ELISA Kit

          類(lèi)別:酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)試劑盒
          規(guī)格:96T/48T
          包裝:盒
          檢測(cè)原理:采用雙抗夾心法
          保質(zhì)期:六個(gè)月
          產(chǎn)品保存條件:2-8°C
          應(yīng)用范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)使用
          樣品形式:血清/血漿/組織勻漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體(具體情況請(qǐng)咨詢(xún))
          小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF)  ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存
          1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存  過(guò)程 中  如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          3.尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
          4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。  檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以 使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
          標(biāo)本要求: 
          1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
          2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
          試劑盒組成:
          48孔配制:
          1. 說(shuō)明書(shū): 1份
          2. 封板膜:  2片(48)
          3. 密封袋:  1個(gè)
          4  酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
          5. 標(biāo)準(zhǔn)品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
          6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
          7. 酶標(biāo)試劑:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          8. 樣品稀釋液:    3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          9. 顯色劑A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          10 .顯色劑B液:  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          11 .終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
          12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
          96孔配置:
          1.  說(shuō)明書(shū):1份
          2.  封板膜:2片(96)
          3.  密封袋: 1個(gè)
          4.  酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
          5.  標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
          6.  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
          7.  酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          8.  樣品稀釋液:    3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          9.  顯色劑A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          10. 顯色劑B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
          11. 終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
          12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
          小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF)  ELISA試劑盒需要自備的試劑和器材
          1.37℃恒溫箱。
          2.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
          3.精密移液器及一次性吸頭
          4.蒸餾水,
          5.一次性試管
          6.吸水紙
          小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF)  ELISA試劑盒操作步驟
          1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)涸诿笜?biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為9mmol/L,6 mmol/L,3 mmol/L,1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。
          2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
          3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
          4、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
          5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重
          6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
          7、溫育:操作同3。
          8、洗滌:操作同5。
          9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
          10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
          11、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
          洗板方法
          手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
          自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
          注意事項(xiàng):
          試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
          濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
          各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
          請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
          封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
          底物請(qǐng)避光保存。
          嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
          所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
          本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
          如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
          計(jì)算:
          以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    
          在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD      
          值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      
          倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      
          準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值      
          代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      
          倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。  
          檢測(cè)范圍、 OD值:
          具體請(qǐng)咨詢(xún)?cè)诰€(xiàn)客服,或者來(lái)電索要詳細(xì)說(shuō)明書(shū)!

          齊一生物科技(上海)有限公司主要經(jīng)營(yíng)進(jìn)口原裝Elisa試劑盒,自產(chǎn)品牌QIYBO試劑盒,并提供免疫分析相關(guān)試劑和檢測(cè)試劑盒。種類(lèi)齊全,價(jià)格實(shí)惠,凡購(gòu)買(mǎi)我公司產(chǎn)品的新老客戶(hù),即可享免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù),可檢測(cè)人源,小鼠,大鼠,豬,狗,猴,兔,羊,雞,牛,鴨子,魚(yú),植物,昆蟲(chóng)等各種種屬樣本。全程提供。如需其他Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)及報(bào)價(jià),可我公司! 

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          小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF)  ELISA試劑盒

          786-185    PROTEIN-Foldase™    80 Preps    -20C    Ambient    12 MONTHS
          786-186    Foldase™-I    100ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-187    Foldase™-II    100ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-188    Foldase™-III    100ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-189    Foldase™-IV    5 x 1.5ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-189D    Foldase™ Dilution Buffer    50ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-190    NAP-BLOCKER™ [2X]    2 x 500ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-190P    NAP-BLOCKER™ in PBS [2X]    2 x 500ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-190T    NAP-BLOCKER™ in TBS [2X]    2 x 500ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-191    Foldase™-V    100ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-192    BLOK™ BLOTTO (5% modified milk protein solution)    2 x 500ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-193    BLOK™ BSA in TBS [10X]    125ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-194    BLOK™ Casein in PBS [1%]    2 x 500ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-195    BLOK™ BSA in PBS [10X]    125ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-196    BLOK™ Casein in TBS [1%]    2 x 500ml    4C    Ambient    12 MONTHS
          786-197    Column, 20ml    25    RT    Ambient    12 MONTHS
          786-198    Spin Column, 1ml    10    RT    Ambient    12 MONTHS
          786-199    Silver D-Stain™    25 Mini Gels    RT    Ambient    12 MONTHS
          786-20    Protein dotMETRIC™    >300 Assays    RT    Ambient    12 MONTHS
          786-200    Gentle IgG Elution Buffer    100ml    RT    Ambient    12 MONTHS
          786-200A    CasPASE™ 1, 4, 5 assay with Ac-WEHD-AFC substrate    50 Assays    -20C    Blue Ice    12 MONTHS
          786-200B    CasPASE™ 1, 4, 5 assay with Ac-WEHD-AFC substrate    100 Assays    -20C    Blue Ice    12 MONTHS
          786-201    Gentle IgG Elution Buffer    1L    RT    Ambient    12 MONTHS

           

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