小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF) ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):mouse Insulin Promoter Factor 1 (IPF) ELISA Kit
類(lèi)別:酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:96T/48T
包裝:盒
檢測(cè)原理:采用雙抗夾心法
保質(zhì)期:六個(gè)月
產(chǎn)品保存條件:2-8°C
應(yīng)用范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)使用
樣品形式:血清/血漿/組織勻漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體(具體情況請(qǐng)咨詢(xún))
小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF) ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存 過(guò)程 中 如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3.尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以 使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
試劑盒組成:
48孔配制:
1. 說(shuō)明書(shū): 1份
2. 封板膜: 2片(48)
3. 密封袋: 1個(gè)
4 酶標(biāo)包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .顯色劑B液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置:
1. 說(shuō)明書(shū):1份
2. 封板膜:2片(96)
3. 密封袋: 1個(gè)
4. 酶標(biāo)包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 標(biāo)準(zhǔn)品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶標(biāo)試劑: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 樣品稀釋液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 顯色劑A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 顯色劑B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 終止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF) ELISA試劑盒需要自備的試劑和器材
1.37℃恒溫箱。
2.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3.精密移液器及一次性吸頭
4.蒸餾水,
5.一次性試管
6.吸水紙
小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF) ELISA試劑盒操作步驟
1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)涸诿笜?biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為9mmol/L,6 mmol/L,3 mmol/L,1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重
6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
注意事項(xiàng):
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請(qǐng)避光保存。
嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
檢測(cè)范圍、 OD值:
具體請(qǐng)咨詢(xún)?cè)诰€(xiàn)客服,或者來(lái)電索要詳細(xì)說(shuō)明書(shū)!
齊一生物科技(上海)有限公司主要經(jīng)營(yíng)進(jìn)口原裝Elisa試劑盒,自產(chǎn)品牌QIYBO試劑盒,并提供免疫分析相關(guān)試劑和檢測(cè)試劑盒。種類(lèi)齊全,價(jià)格實(shí)惠,凡購(gòu)買(mǎi)我公司產(chǎn)品的新老客戶(hù),即可享免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù),可檢測(cè)人源,小鼠,大鼠,豬,狗,猴,兔,羊,雞,牛,鴨子,魚(yú),植物,昆蟲(chóng)等各種種屬樣本。全程提供。如需其他Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)及報(bào)價(jià),可我公司!
: /60348496
齊一生科技(上海)有限公司 感謝您的查閱與咨詢(xún)!期待與您的真誠(chéng)合作!
小鼠胰島素啟動(dòng)因子1(IPF) ELISA試劑盒
786-185 PROTEIN-Foldase™ 80 Preps -20C Ambient 12 MONTHS
786-186 Foldase™-I 100ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-187 Foldase™-II 100ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-188 Foldase™-III 100ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-189 Foldase™-IV 5 x 1.5ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-189D Foldase™ Dilution Buffer 50ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-190 NAP-BLOCKER™ [2X] 2 x 500ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-190P NAP-BLOCKER™ in PBS [2X] 2 x 500ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-190T NAP-BLOCKER™ in TBS [2X] 2 x 500ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-191 Foldase™-V 100ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-192 BLOK™ BLOTTO (5% modified milk protein solution) 2 x 500ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-193 BLOK™ BSA in TBS [10X] 125ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-194 BLOK™ Casein in PBS [1%] 2 x 500ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-195 BLOK™ BSA in PBS [10X] 125ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-196 BLOK™ Casein in TBS [1%] 2 x 500ml 4C Ambient 12 MONTHS
786-197 Column, 20ml 25 RT Ambient 12 MONTHS
786-198 Spin Column, 1ml 10 RT Ambient 12 MONTHS
786-199 Silver D-Stain™ 25 Mini Gels RT Ambient 12 MONTHS
786-20 Protein dotMETRIC™ >300 Assays RT Ambient 12 MONTHS
786-200 Gentle IgG Elution Buffer 100ml RT Ambient 12 MONTHS
786-200A CasPASE™ 1, 4, 5 assay with Ac-WEHD-AFC substrate 50 Assays -20C Blue Ice 12 MONTHS
786-200B CasPASE™ 1, 4, 5 assay with Ac-WEHD-AFC substrate 100 Assays -20C Blue Ice 12 MONTHS
786-201 Gentle IgG Elution Buffer 1L RT Ambient 12 MONTHS
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀(guān)點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。