內(nèi)毒素，也稱為脂多糖和脂多糖（LPS），是由脂質(zhì)和多糖組成的大型分子，多糖由 O-抗原、外核心和內(nèi)核心通過共價(jià)鍵連接而成；它們存在于革蘭氏陰性菌的外膜中，并在動物體內(nèi)引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。

人內(nèi)毒素（ET）ELISA 試劑盒是一種用于體外定量測量人血清、血漿、細(xì)胞裂解液和其他生物液體中內(nèi)毒素（ET）濃度的 ELISA 試劑盒。

艾美捷人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒：

貨號：abx051541

靶標(biāo)：內(nèi)毒素（ET）

反應(yīng)性：人

檢測應(yīng)用：ELISA

推薦稀釋度：最終用戶應(yīng)確定最佳稀釋度/濃度。

儲存：運(yùn)輸時(shí)溫度為 4 °C。收到后，請按照試劑盒說明書中的儲存說明進(jìn)行儲存.

有效期：該試劑盒的有效期為 6 個(gè)月.

穩(wěn)定性：試劑盒的穩(wěn)定性由活性損失率決定。在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下，有效期內(nèi)的損失率小于 5%。為了盡量減少性能波動，操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件應(yīng)嚴(yán)格控制。還強(qiáng)烈建議整個(gè)檢測過程由同一位用戶完成.

檢測范圍：0.015 EU/ml - 1.0 EU/ml

靈敏度：< 0.01 EU/ml

標(biāo)準(zhǔn)品形式：凍干

檢測方法：比色法

檢測類型：競爭法

檢測數(shù)據(jù)：定量

樣本類型：血清、血漿和其他生物液體.

靶標(biāo)類型：抗原

檢測原理：該試劑盒基于競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)技術(shù)。96 孔板上預(yù)先包被有抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣本和生物素偶聯(lián)試劑加入到孔中并孵育。生物素標(biāo)記的 ET 和未標(biāo)記的 ET 在預(yù)包被抗體上發(fā)生競爭抑制反應(yīng)。然后加入 HRP 偶聯(lián)試劑，并將整個(gè)板孵育。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的偶聯(lián)物。使用 TMB 底物來定量 HRP 酶促反應(yīng)。加入 TMB 底物后，只有含有足夠 ET 的孔才會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與板上結(jié)合的 ET 量成反比。在微孔板讀數(shù)儀中以 450 nm 波長光譜光度法測量 OD，從而可以計(jì)算出 ET 的濃度.

試劑盒組成：列出的試劑盒組成僅供參考。產(chǎn)品說明書可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨產(chǎn)品一起提供的產(chǎn)品說明書中的說明使用.

預(yù)包被的 96 孔微孔板

標(biāo)準(zhǔn)品

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

洗滌緩沖液

檢測試劑 A

檢測試劑 B

稀釋液 A

稀釋液 B

TMB 底物

終止液

板封膜

所需但未提供的材料：

37°C 培養(yǎng)箱

多通道和單通道移液管及無菌移液槍頭

噴霧瓶或自動微孔板洗滌器

1.5 ml 管

蒸餾水

吸水濾紙

100 ml 和 1 升量筒

微孔板讀數(shù)儀（波長：450 nm）

ELISA 振蕩器

試劑準(zhǔn)備：此程序僅供參考。產(chǎn)品說明書可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨產(chǎn)品一起提供的產(chǎn)品說明書中的說明使用.

標(biāo)準(zhǔn)品：用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液制備標(biāo)準(zhǔn)品溶液。然后按照協(xié)議中的指示，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液對標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行系列稀釋.

洗滌緩沖液：按照協(xié)議中的指示，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液.

檢測試劑準(zhǔn)備：計(jì)算所需的工作溶液的總體積。分別用稀釋液 A 和稀釋液 B 將檢測試劑 A 和檢測試劑 B 稀釋 1:100.

檢測程序：此程序僅供參考。產(chǎn)品說明書可能略有不同。產(chǎn)品應(yīng)按照隨產(chǎn)品一起提供的產(chǎn)品說明書中的說明使用.

設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣本和對照孔.

將 50 µl 稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品加入到標(biāo)準(zhǔn)品孔中.

將 50 µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液加入到對照（零）孔中.

將 50 µl 稀釋后的樣本加入到樣本孔中.

立即向每個(gè)孔中加入 50 µl 檢測試劑 A。在 37 °C 下孵育 1 小時(shí).

洗滌 3 次.

向每個(gè)孔中加入 100 µl 檢測試劑 B。在 37 °C 下孵育 30 分鐘.

洗滌 5 次.

向每個(gè)孔中加入 90 µl TMB 底物。在 37 °C 下孵育 10-20 分鐘.

加入 50 µl 終止液.

在 450 nm 處測量 OD.

協(xié)議：此程序僅供參考。在使用前將試劑盒組分和樣本平衡至室溫（18 - 25 °C）。建議每次測試?yán)L制標(biāo)準(zhǔn)曲線.

在預(yù)包被板上分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣本和對照（零）孔，然后記錄它們的位置。建議每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣本至少重復(fù)測量兩次.

將 50 µL 的每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、對照和樣本加入到相應(yīng)的孔中.

移除蓋子并丟棄液體.

立即加入 50 µl 檢測試劑 A 工作溶液。用蓋子封住板，在 37°C 下孵育 1 小時(shí).

移除蓋子并丟棄溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌板 3 次.

向每個(gè)孔中加入 100 µL 檢測試劑 B 工作溶液，封住并孵育 37°C 30 分鐘.

丟棄溶液并按照前一步驟用洗滌緩沖液洗滌板 5 次.

向每個(gè)孔中加入 90 µl TMB 底物。用蓋子封住板，在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。避免暴露在光下。孵育時(shí)間僅供參考，最佳時(shí)間應(yīng)由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘.

向每個(gè)孔中加入 50 µL 終止液。立即在 450 nm 處讀取.

結(jié)果計(jì)算：該檢測是競爭性的，因此樣本中 ET 濃度與測量的吸光度之間存在負(fù)相關(guān)。創(chuàng)建一個(gè)以標(biāo)準(zhǔn)濃度的對數(shù)（y 軸）和平均吸光度（x 軸）為坐標(biāo)的圖表。通過標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)應(yīng)用最佳擬合趨勢線。樣本的 ET 濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上插值得出.

可獲得性：5-12 個(gè)工作日內(nèi)發(fā)貨.

注意事項(xiàng)：本品僅限研究使用.

范圍和靈敏度可能會發(fā)生變化。為獲得準(zhǔn)確結(jié)果，樣本濃度必須稀釋至試劑盒的中等范圍。請注意，Abbexa的 ELISA 和 CLIA 試劑盒針對的是天然樣本的檢測，而不是重組蛋白。Abbexa無法保證重組蛋白的檢測，因?yàn)樗鼈兛赡芫哂信c天然蛋白不同的序列或三級結(jié)構(gòu)。

標(biāo)準(zhǔn)品：1 EU/ml

批內(nèi)精密度：CV ≤ 4.3%

批間精密度：CV ≤ 5.5%

數(shù)據(jù)示例：

圖：顯示人類內(nèi)毒素（ET）標(biāo)準(zhǔn)OD數(shù)據(jù)的圖表