摘要 本應(yīng)用探討了新電噴霧儀器與液相色譜/飛行時(shí)間質(zhì)譜 (LC/ TOFMS) 和液相色譜/離子阱質(zhì)譜 (LC/ITMS) 用于分析水果 (蘋(píng)果,檸檬,瓜和桔子) 提取物和沙拉蔬菜 (西紅柿,菜花和柿子 椒) 中的五種主要?dú)⒄婢鷦┑目赡苄?。包括不同水果和蔬菜?質(zhì)中五種主要?dú)⒄婢鷦ǘ嗑`、噻苯咪唑、氧化偶氮烯酰碼啉、氟菌唑）的 LC/TOFMS 及 LC/ITMS MS/MS 譜 圖，TOF 實(shí)驗(yàn)分子式，MS/MS 碎片及確認(rèn)離子。給出了水果 及蔬菜中殺真菌劑的樣品快速前處理及萃取方法的詳細(xì)說(shuō)明的 同時(shí)提供使用 TOF 和離子阱分析純?nèi)軇┖退笆卟颂崛∥镏?殺真菌劑的檢出限 (LOD)、線性及定量的譜圖。最后是市售的 實(shí)際樣品水果及蔬菜：蘋(píng)果，桔子，檸檬和瓜中殺真菌劑的分 析結(jié)果。

介紹 本文描述了鑒別和定量分析水果及蔬菜中殺真菌劑的 重要性 [1, 2]。歐盟指南中愈來(lái)愈多地使用 LC/MS 分析許多常見(jiàn)的殺真菌劑，很快成為了法規(guī)監(jiān)測(cè)承認(rèn) 的農(nóng)藥殘留分析方法。LC/MS 尤其適用于極性和不 穩(wěn)定的各種殺真菌劑的分析。因此，LC/MS 方法比 傳統(tǒng)的 GC/MS 方法更加適合使用。比如，Pico 等人 對(duì) MS 和 MS/MS 在食品中農(nóng)藥（包括殺真菌劑）分 析的應(yīng)用進(jìn)行了綜述 [3]，目前有大致 100 篇文章涉 及食品中農(nóng)藥分析的內(nèi)容，其中大約 25 篇左右是使 用 LC/MS 的，多數(shù)文章在 2000 年初發(fā)表。因此， LC/MS 是食品分析的新興技術(shù)。然而，很有意思的 是，許多最近的文章中，沒(méi)有一篇使用 LC/TOFMS 和精確質(zhì)量數(shù)分析食品中殺真菌劑。 所以，開(kāi)發(fā)研究 LC/TOFMS 方法，以精確質(zhì)量數(shù)分 析食品中的農(nóng)藥顯得十分重要 [1, 2]。我們目前的研 究報(bào)告是最先使用最新的安捷倫 LC/MSD TOF 分析 食品中殺真菌劑的方法之一。選擇本主題的原因在于 這些殺真菌劑在蘋(píng)果，桔子，檸檬，瓜，西紅柿，菜 花和柿子椒中的大量使用。并且，LC/ITMS 也將作 為 LC/TOFMS 的比較方法用于分析水果及蔬菜中的 殺真菌劑。如何同時(shí)使用 LC/ITMS 方法細(xì)節(jié)也有描 述 [2]。

實(shí)驗(yàn)方法 水果和蔬菜的提取 (QuEChERS) QuEChERS 是一種提取方法的縮寫(xiě)，字母分別代表 快速，簡(jiǎn)便，經(jīng)濟(jì)，有效，持久和安全。該方法在食 品中農(nóng)藥分析的快速提取方面得到廣泛的認(rèn)可。是一 種提取方法的縮寫(xiě)，字母分別代表快速，簡(jiǎn)便，經(jīng)濟(jì)， 有效，持久和安全。該方法在食品中農(nóng)藥分析的快速 提取方面得到廣泛的認(rèn)可。 1. 稱取 15 g 預(yù)先混勻的樣品于 40 mL 特氟龍離心管 中。加入 15 mL 乙睛（含 1% 乙酸），6 g 無(wú)水硫 酸鎂和 2.5 g 三水乙酸鈉，用旋渦振蕩器在最大速 度或手動(dòng)振蕩樣品 1 min。然后，于 3700 rpm 離 心 3 min。 2. 取 5 mL 上層清液于 15-mL 試管中，加入 250 mg PSA 吸附劑及 750 mg 硫酸鎂，旋渦振蕩 20 s。 然后，于 3700 rpm 再次離心 3 min。將 1.0 mL 離心液轉(zhuǎn)入自動(dòng)進(jìn)樣瓶。然后將水果及蔬菜的提 取液殘留物蒸發(fā)至干并用 8/92% 的甲醇/水溶解。

安捷倫 LC/MSD TOF 方法 • LC 泵為安捷倫 1100 二元泵，使用標(biāo)準(zhǔn)安捷倫 1100 自動(dòng)進(jìn)樣器，進(jìn)樣體積 50 µL • 色譜柱：ZORBAX® Eclipse XDB-C8, 4.6 mm× 150 mm，5 µm, 部件號(hào) 993967-906 • 流動(dòng)相 A：乙睛；流動(dòng)相 B：0.1% 甲酸水溶液， 梯度：15% A 0-5 min，100% A，25 min， 0.6 mL/min 流速 • 安捷倫電噴霧源 - LC/MSD TOF • 正模式 ESI，毛細(xì)管電壓 4000 V • 霧化器 40 psig，干燥氣 9 L/min，氣體溫度 300 °C • 裂解電壓 190 V，撇除器電壓 60 V，八級(jí)桿直流 電壓 37.5 V，八級(jí)桿 RF 電壓 250 V • 參考質(zhì)量：m/z 121.0509 和 922.0098,分辨率： 在 m/z 922.0098 處為 9500±500，分析時(shí)在噴霧 器 2 連續(xù)恒流使用參比 A

安捷倫 1100 系列 LC/MSD 離子阱方法 • 為便于直接比較色譜峰，使用與安捷倫 LC/MSD TOF 一致的色譜方法 • LC 泵為安捷倫 1100，進(jìn)樣體積 50 µL • 色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-C8，4.6 mm× 150 mm，5 µm，部件號(hào) 993967-906 • 流動(dòng)相 A：乙睛；流動(dòng)相 B：0.1% 甲酸水溶液， 梯度：15% A 0-5 min，100% A 25 min， 0.6 mL/min 流速 • 安捷倫 1100 系列 LC/MSD 離子阱 • 正模式電噴霧離子源 (ESI) 毛細(xì)管電壓 3200 V • 霧化器 40 psig,干燥氣 9 L/min，氣體溫度 300 °C • 毛細(xì)管出口電壓 70 V • 離子滯留，計(jì)數(shù) 50,000 次

結(jié)果與討論 裂解及質(zhì)量精度 圖 3 顯示了五種殺真菌劑的 LC 分離情況。樣品含加 入檸檬提取物的 0.125 mg/kg (ppm) 殺真菌劑。圖 3b 顯示了各個(gè)化合物的提取離子色譜圖。提取物窗 口很干凈，說(shuō)明提取離子的質(zhì)量精度很高，提取離子 窗口寬度可窄至 (0.02 amu) 100 ppm。圖 3 提取離 子的窗口為 0.1 amu。

當(dāng)濃度低至 0.05 mg/kg 時(shí)，提取離子 (m/z 192， 202，346，388 和 404) 的色譜圖仍然很干凈，表明 精確質(zhì)量數(shù)的重要性及其在很窄的窗口提供干凈色譜 圖的能力。在測(cè)定每個(gè)殺真菌劑的分子離子精確質(zhì)量 時(shí)顯示精確質(zhì)量的窗口。表 1 顯示了每個(gè)殺真菌劑在 0.50 mg/kg 濃度時(shí)的檢測(cè)結(jié)果，包括元素組成，精 確質(zhì)量及誤差，分別以 mDa 和 ppm 表示。除烯酰 碼啉外，在所有水果和蔬菜介質(zhì)樣品的分析中均獲得 了高于 2 ppm 的質(zhì)量精度。