基質(zhì)膠的概念

基質(zhì)膠是一種模擬細(xì)胞外基質(zhì)的生物材料，它能夠為細(xì)胞提供必要的支持和信號，影響細(xì)胞的行為和功能。它是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS （Engelbreth Holm Swarm）小鼠腫瘤中提取的可溶性基底膜制備物，幾乎包含所有的基底膜成分，能良好模擬基底膜細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)特性，為生命科學(xué)研究中多種實驗?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建提供關(guān)鍵生物材料，是類器官培養(yǎng)的重要載體。

基質(zhì)膠主要成分為層粘連蛋白，Ⅳ型膠原蛋白，巢蛋白。同時，基質(zhì)膠也包含多種生長因子，例如表皮生長因子EFG，血小板衍生生長因子PDGF，神經(jīng)生長因子NGF，堿性成纖維細(xì)胞生長因子FGF-2，乙型轉(zhuǎn)化生長因子TGF-beta和胰島素樣生長因子ILGF。

基質(zhì)膠的應(yīng)用原理

細(xì)胞生長環(huán)境:基質(zhì)膠為細(xì)胞提供一個支撐和生長的環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞貼壁和生長。

影響基因表達(dá):基質(zhì)膠能夠影響成年大鼠肝細(xì)胞基因表達(dá)，為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制提供重要手段。

促進(jìn)血管生成: 基質(zhì)膠在血管生成實驗中發(fā)揮關(guān)鍵作用，有助于研究新血管的形成機(jī)制。

基質(zhì)膠的制備方法

EHS小鼠腫瘤提取: 基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取的可溶性基底膜制備物。

層析技術(shù): 基質(zhì)膠的制備通常涉及層析技術(shù)，確保其成分的純度和生物活性。

基質(zhì)膠的市場前景

全球市場規(guī)模擴(kuò)大: 基質(zhì)膠市場的規(guī)模持續(xù)擴(kuò)大，主要得益于生物技術(shù)的飛速發(fā)展。

實驗研究需求: 隨著實驗研究的不斷增多，對基質(zhì)膠的需求也在日益增長。

基質(zhì)膠在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用

01

干細(xì)胞的研究

干細(xì)胞培養(yǎng): 基質(zhì)膠為干細(xì)胞培養(yǎng)提供理想的生長環(huán)境，促進(jìn)干細(xì)胞的分化和增殖。

組織工程: 基質(zhì)膠在干細(xì)胞組織工程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，有助于構(gòu)建功能性組織。

02

代謝及毒理研究

代謝研究: 基質(zhì)膠在代謝和毒理學(xué)研究中應(yīng)用廣泛，有助于揭示細(xì)胞代謝機(jī)制。

藥物篩選: 基質(zhì)膠為藥物篩選提供重要的細(xì)胞模型和研究工具。

03

細(xì)胞侵襲實驗

Transwell細(xì)胞體外侵襲實驗: 基質(zhì)膠在Transwell細(xì)胞體外侵襲實驗中發(fā)揮關(guān)鍵作用，有助于研究細(xì)胞侵襲機(jī)制。

腫瘤細(xì)胞侵襲試驗: 基質(zhì)膠在開發(fā)某些腫瘤細(xì)胞侵襲試驗中發(fā)揮重要作用，為腫瘤研究提供重要支持。

基質(zhì)膠在其他實驗領(lǐng)域中的應(yīng)用

01

血管生成實驗

血管生成機(jī)制研究: 基質(zhì)膠在血管生成實驗中發(fā)揮關(guān)鍵作用，有助于研究新血管的形成機(jī)制。

藥物開發(fā): 基質(zhì)膠為血管生成藥物開發(fā)提供重要的實驗?zāi)Ｐ秃脱芯抗ぞ摺?/p>

02

類器官體外3D培養(yǎng)

類器官培養(yǎng): 基質(zhì)膠為類器官體外3D培養(yǎng)的研究提供理想的生長環(huán)境，促進(jìn)類器官的發(fā)育和功能。

疾病模型: 基質(zhì)膠在構(gòu)建疾病模型中發(fā)揮關(guān)鍵作用，有助于揭示疾病的發(fā)生機(jī)制。

03

神經(jīng)再生研究

周神經(jīng)再生: 基質(zhì)膠在體內(nèi)外周神經(jīng)再生研究中發(fā)揮重要作用，為神經(jīng)再生研究提供重要支持。

神經(jīng)損傷修復(fù): 基質(zhì)膠為神經(jīng)損傷修復(fù)研究提供重要的實驗工具和模型。

04

教育與科研

教育應(yīng)用: 基質(zhì)膠在教育和科研中應(yīng)用廣泛，為培養(yǎng)科研人才和推動科學(xué)發(fā)展提供重要支持。

科研合作: 基質(zhì)膠為科研合作提供重要的實驗工具和模型，促進(jìn)科學(xué)研究的深入和創(chuàng)新。

基質(zhì)膠常見分類及推薦應(yīng)用

根據(jù)不同的應(yīng)用需求，基質(zhì)膠有多種類型，每種類型都具有其特定的特點(diǎn)和推薦應(yīng)用。以下是基質(zhì)膠的一些常見分類及其推薦應(yīng)用：

01

標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠：

特點(diǎn)：含有豐富的生長因子，如表皮生長因子、血小板衍生生長因子等。

推薦應(yīng)用：常規(guī)的細(xì)胞實驗，如2D和3D培養(yǎng)，細(xì)胞侵襲、遷移實驗等。

02

低生長因子基質(zhì)膠：

特點(diǎn)：生長因子含量減少，減少了細(xì)胞生長和分化的促進(jìn)作用。

推薦應(yīng)用：對基質(zhì)成分要求嚴(yán)格的實驗，如細(xì)胞信號通路和細(xì)胞因子等的研究。

03

高濃度基質(zhì)膠：

特點(diǎn)：蛋白濃度較高，有助于研究血管生成、腫瘤細(xì)胞遷移和體內(nèi)腫瘤模型的建立等。

推薦應(yīng)用：研究血管生成、腫瘤生長和體內(nèi)應(yīng)用研究，如高濃度蛋白可促進(jìn)腫瘤生長。

04

無酚紅基質(zhì)膠：

特點(diǎn)：不含酚紅，適合需要進(jìn)行熒光檢測或顯色反應(yīng)等分析的實驗。

推薦應(yīng)用：熒光檢測或顯色反應(yīng)等分析。

05

人胚胎干細(xì)胞專用基質(zhì)膠：

特點(diǎn)：經(jīng)過對人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的測試，適合人胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)。

推薦應(yīng)用：人胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)和研究。

06

類器官用基質(zhì)膠：

特點(diǎn)：適合用于類器官的培養(yǎng)，模擬體內(nèi)環(huán)境，支持細(xì)胞的三維生長。

推薦應(yīng)用：類器官的培養(yǎng)，如器官芯片和疾病模型研究。

這些基質(zhì)膠類型各有特點(diǎn)，選擇合適的基質(zhì)膠類型可以大大提高實驗的成功率和數(shù)據(jù)的可靠性。在實際應(yīng)用中，應(yīng)根據(jù)實驗的具體需求選擇合適的基質(zhì)膠類型。

埃澤思基質(zhì)膠產(chǎn)品系列

類器官基質(zhì)膠產(chǎn)品

產(chǎn)品優(yōu)勢

01

AC-1001081 標(biāo)準(zhǔn)型-基質(zhì)膠

① 多功能性: 適用于多種實驗類型，包括腫瘤類器官藥敏實驗、血管生成實驗和神經(jīng)軸突3D生長實驗，滿足不同研究需求。

② 快速凝固: 在37°C下迅速凝固，為細(xì)胞提供穩(wěn)定的三維支架環(huán)境，有助于快速實驗設(shè)置和高效實驗結(jié)果獲取。

③ 優(yōu)質(zhì)基質(zhì)支持: 提供穩(wěn)定且富含生物活性的環(huán)境，支持類器官的快速形成和神經(jīng)軸突的生長，確保實驗結(jié)果的可靠性和再現(xiàn)性。

02

AC-1001082 標(biāo)準(zhǔn)型 低生長因子基質(zhì)膠

① 低生長因子含量: 減少外源性生長因子對實驗的干擾，提供一個相對穩(wěn)定的微環(huán)境，有助于精確研究細(xì)胞特定的反應(yīng)。
② 優(yōu)化類器官培養(yǎng): 專為類器官培養(yǎng)設(shè)計，提供適宜的細(xì)胞支持環(huán)境，促進(jìn)類器官的形成和生長。

③ 一致性和穩(wěn)定性: 產(chǎn)品成分一致，確保每批實驗的可重復(fù)性和穩(wěn)定性，適合長期實驗使用。

03

AC-1001083 高濃度-基質(zhì)膠

① 高濃度配方: 提供更堅固的三維結(jié)構(gòu)支架，支持細(xì)胞在體內(nèi)外的穩(wěn)定生長，特別適用于免疫缺陷小鼠成瘤實驗。
② 增強(qiáng)細(xì)胞支持: 高濃度基質(zhì)增加細(xì)胞與基質(zhì)的相互作用，促進(jìn)細(xì)胞的附著、擴(kuò)增和成瘤能力。

③ 適應(yīng)性廣: 可用于多種腫瘤細(xì)胞系，支持不同類型實驗的需求，尤其是需要更強(qiáng)支持的實驗設(shè)計。

04

AC-1001084 高濃度 低生長因子基質(zhì)膠

① 雙重優(yōu)化: 結(jié)合高濃度和低生長因子配方，適用于需要穩(wěn)定支持且避免外源性生長因子干擾的實驗，特別適合免疫缺陷小鼠成瘤實驗。

② 高效成瘤: 在成瘤實驗中提供增強(qiáng)的細(xì)胞支持，確保成瘤效率和實驗的可重復(fù)性。

③ 減少實驗變量: 低生長因子含量減少了實驗中的干擾因素，有助于更精確的實驗結(jié)果分析。

實驗操作

01

腫瘤類器官藥敏實驗（操作所需時間為2小時）

① 將擴(kuò)增好足夠是的腫瘤類器官(實驗組)以及正常類器官(對照組)用4℃預(yù)冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行重懸，緩慢機(jī)械吹打，促進(jìn)膠液化溶解，并保持類器官結(jié)構(gòu)完整（可用于懸浮培養(yǎng)于有5%基質(zhì)膠溶液的基質(zhì)膠表面）（Guillen al. 2022）?；蛘咄ㄟ^TryplE酶消化獲得單細(xì)胞懸液。

② 離心收集類器官細(xì)胞，并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

③ 加入AppliedCell®基質(zhì)膠原液，與細(xì)胞進(jìn)行混勻。

④ 將細(xì)胞與膠的混合物，通過排槍加入37℃預(yù)熱過的96孔板或者384孔板，立即將孔板放入培養(yǎng)箱。

⑤ 大約10min后，AppliedCell®基質(zhì)膠將凝固，加入相應(yīng)體積的類器官培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。

⑥ 類器官形成后（如果是機(jī)械吹打，類器官將在傳代24h后就會形成；如果是酶消化，類器官會在3-5天后形成），每個孔分別加入含有PI染料以及不同種類、不同濃度的待篩選的抗腫瘤藥物。

⑦ 在高內(nèi)涵顯微鏡上進(jìn)行活細(xì)胞成象，測定腫瘤類器官對各種藥物的敏感性。

02

血管生成實驗（以永生化HUVEC細(xì)胞系為例，操作所需時間為1小時）

① 將培養(yǎng)基換成饑餓細(xì)胞用培養(yǎng)基：加入含0.2%FBS，2mM L-谷氨酰胺，1mM丙酮酸鈉，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時。

② 將AppliedCell®基質(zhì)膠均勻鋪滿96孔板底。注意：槍頭需提前預(yù)冷半小時。盡量在冰上操作，避免基質(zhì)膠過早固化，避免氣泡產(chǎn)生。

③ 將96孔板在細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育30min，固化基質(zhì)膠。

④ 消化HUVEC細(xì)胞，并計數(shù)。

⑤ 將200μL的HUVEC細(xì)胞懸液（含5X10^4個細(xì)胞）加于含基質(zhì)膠的96孔板中。將96孔板放于培養(yǎng)箱。

⑥ 血管樣網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)將于3至12小時間形成。

⑦ 在血管網(wǎng)絡(luò)形成最佳時間，小心去除培養(yǎng)基，并用加入含活細(xì)胞染料1/1000 Calcein AM（綠色）的培養(yǎng)基進(jìn)行染色，并用顯微鏡進(jìn)行拍照記錄。

03

神經(jīng)軸突3D生長實驗（以大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞為例，操作所需時間為2小時）

① 取孕期12-15天的大鼠胚胎，用眼科剪和眼科攝分離出大腦皮層于4°C預(yù)冷的DMEM培養(yǎng)基中。

② 用吸管輕緩吹打，然后用70μm濾網(wǎng)過來，獲得單細(xì)胞懸液，并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

③ 離心（300g，3min），棄上清。將細(xì)胞與AppliedCell®基質(zhì)膠進(jìn)行混合，然后將基質(zhì)膠混合物滴加在24孔板中，每孔50μl。

④ 將24孔板放于培養(yǎng)箱，大約10min后，Applied Cell®基質(zhì)膠將凝固。加入1mL神經(jīng)元分化培養(yǎng)基：Neurobasal medium，2%B27，2mM L-glutamine，5%FBS，20ng/mL EGF和20ng/mL bFGF， 100U/mL penicillin 和100 μg/mL streptomycin。第二天開始，就能觀索到有明顯的神經(jīng)軸突生長。

⑤ 在第7天可觀察到大量的神經(jīng)突（Neurite）長出。

注意事項

AppliedCell®基質(zhì)膠在溫度高于10℃時就會開始凝固成膠，所以盡量在冰上操作基質(zhì)膠。

類器官傳代時，如果為了避免酶對類器官造成影響，可直接用4℃預(yù)冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基對基質(zhì)膠進(jìn)行緩慢吹打，即可將類器官從基質(zhì)膠中釋放出來。

埃澤思即用型基質(zhì)膠

產(chǎn)品介紹

AC-1001007 即用型基質(zhì)膠

AC-1001097 Ready to Use Vtn

規(guī)格：100mL

保存條件：2~8℃，冰袋運(yùn)輸

保質(zhì)期：12個月

用于培養(yǎng)板表面包被，為干細(xì)胞（ES/iPS）、心肌細(xì)胞等多種細(xì)胞提供貼壁基質(zhì)。

產(chǎn)品優(yōu)勢

* 性質(zhì)穩(wěn)定，可在4℃儲存

* 省掉多個準(zhǔn)備步驟（冰凍、解凍、稀釋），節(jié)省時間，提供實驗效率