前言
地膚子是藜科植物地膚的干燥成熟果實 ,具有清熱利濕、抗炎、抗過敏、抗搔癢等功效,常用于治療小便澀痛、風疹、濕疹、皮膚搔癢等癥狀。地膚子主要含三萜皂苷、生物堿、黃酮類等成分,其中三萜皂苷類成分主要為地膚子皂苷Ic。由于地膚子皂苷Ic在200nm左右有末端吸收,使用常規(guī)的紫外檢測器進行檢測時,往往基線噪音大,靈敏度較低。建議使用蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)對地膚子中地膚子皂苷Ic進行檢測。
本篇文章參考了《中國藥典》中地膚子的含量測定項下高效液相色譜法色譜條件,采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測器對地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進行檢測。實驗結(jié)果顯示,地膚子皂苷Ic對照溶液(500μg/mL)分別進樣10μL、20μL,地膚子皂苷Ic色譜峰的理論塔板數(shù)均高于3000,滿足實驗分析需求。標曲實驗采用外標兩點法對數(shù)方程計算,地膚子皂苷Ic標準曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)>0.999,滿足實驗分析需求。地膚子皂苷Ic溶液(500μg/mL,10μL)重復進樣5次,保留時間RSD值為0.265%,峰面積RSD值為0.564%。地膚子皂苷Ic溶液(500μg/mL,20μL)重復進樣5次,保留時間RSD值為0.088%,峰面積RSD值為0.403%,重復性較好。取地膚子作為測試樣品,根據(jù)地膚子皂苷Ic標準品色譜峰保留時間進行定性,對地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進行檢測。結(jié)果顯示,地膚子藥材中含地膚子皂苷Ic 3.5 %,滿足標準要求。說明該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足對地膚子藥材中地膚子皂苷Ic的檢測需求。
關(guān)鍵詞:地膚子皂苷Ic;高效液相色譜法;蒸發(fā)光散射檢測器;地膚子。
1 實驗方法
1.1 儀器配置
1.3測試條件
1.4溶液配制和測定方法
地膚子皂苷Ic對照溶液(500μg/mL)
取地膚子皂苷Ic對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1 mL含0.5mg的溶液,即得。
2 結(jié)果與討論
2.1 系統(tǒng)適用性
說明:由上述譜圖可見,地膚子皂苷Ic對照溶液(500μg/mL)分別進樣10μL、20μL,地膚子皂苷Ic色譜峰的理論塔板數(shù)均高于3000,滿足實驗分析需求。
2.2 標準曲線
說明:在使用蒸發(fā)光散射檢測器時,由于散射光的信號為非線性的,根據(jù)ELSD的工作原理,進樣質(zhì)量(μg)和ELSD檢測器的響應值(峰面積A)一般不呈現(xiàn)良好的線性。因為信號的響應值與物質(zhì)質(zhì)量的對數(shù)呈線性關(guān)系,如果對進樣質(zhì)量和峰面積分別取常用對數(shù)后,兩者呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,但是它是一條不經(jīng)過原點的直線,所以在應用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測器(HPLC-ELSD)進行藥物含量測定時必須使用外標兩點法對數(shù)方程計算。本次測試分別精密吸取地膚子皂苷Ic對照溶液(500μg/mL)10μL、20μL,注入液相色譜儀,測定。地膚子皂苷Ic標準曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)>0.999,滿足實驗分析需求。
2.3 重復性
2.4 樣品測試
說明:根據(jù)地膚子皂苷Ic標準品色譜峰的保留時間進行定性,對地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進行檢測。結(jié)果顯示,地膚子含地膚子皂苷Ic 3.5 %,滿足標準中大于1.8 %的要求。
2.5 注意事項
(1) 地膚子皂苷Ic對照溶液需避光保存。
(2) 在制備相關(guān)溶液時需要注意佩戴好實驗室防護用品。
3 結(jié)論
本篇文章參考了最新版《中國藥典》中地膚子的含量測定項下高效液相色譜法色譜條件,采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測器對地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進行檢測。實驗結(jié)果顯示,地膚子皂苷Ic對照溶液(500μg/mL)分別進樣10μL、20μL,地膚子皂苷Ic色譜峰的理論塔板數(shù)均高于3000,滿足實驗分析需求。標曲實驗采用外標兩點法對數(shù)方程計算,地膚子皂苷Ic標準曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)>0.999,滿足實驗分析需求。地膚子皂苷Ic溶液(500μg/mL,10μL)重復進樣5次,保留時間RSD值為0.265%,峰面積RSD值為0.564%。地膚子皂苷Ic溶液(500μg/mL,20μL)重復進樣5次,保留時間RSD值為0.088%,峰面積RSD值為0.403%,重復性較好。取地膚子作為測試樣品,根據(jù)地膚子皂苷Ic標準品色譜峰保留時間進行定性,對地膚子樣品中地膚子皂苷Ic進行檢測。結(jié)果顯示,地膚子藥材中含地膚子皂苷Ic 3.5 %,滿足標準要求。說明該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足對地膚子藥材中地膚子皂苷Ic的檢測需求。
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