黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


          化工儀器網(wǎng)>技術中心>操作使用>正文

          歡迎聯(lián)系我

          有什么可以幫您? 在線咨詢

          人皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒使用說明書

          來源:上海研謹生物科技有限公司   2024年12月24日 12:24  

          本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷

          Human皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒

          使用說明書

          檢測原理

          試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被皮質(zhì)醇(Cortisol)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的皮質(zhì)醇(Cortisol)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

          樣品收集、處理及保存方法

          1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

          2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

          3.  細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

          4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

          5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          自備物品

          1. 酶標儀(450nm)

          2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

          3. 37℃恒溫箱

          操作注意事項

          1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

          2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

          3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

          4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

          5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

          試劑盒組成

          名稱

          96孔配置

          48孔配置

          備注

          微孔酶標板

          12孔×8條

          12孔×4條

          標準品

          0.3mL*6管

          0.3mL*6管

          樣本稀釋液

          6mL

          3mL

          檢測抗體-HRP

          10mL

          5mL

          20×洗滌緩沖液

          25mL

          15mL

          按說明書進行稀釋

          底物A

          6mL

          3mL

          底物B

          6mL

          3mL

          終止液

          6mL

          3mL

          封板膜

          2張

          2張

          說明書

          1份

          1份

          自封袋

          1個

          1個

          注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、75、150、300、600、1200 nmol/L

          試劑的準備

           20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

          洗板方法

          1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

          2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

          操作步驟

          1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

          2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

          3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

          4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

          5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

          6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

          7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

          結(jié)果判斷

           繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

          637227372275736775452.png

           

          試劑盒性能

          1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。

          2.  靈敏度:最DI檢測濃度小于1.0 nmol/L。

          3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

          4.  重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

          5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

          6.  有效期:6個月

          2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫(yī)學實驗技術及論文潤色服務,協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

          如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

          實驗技術服務:


          免責聲明

          • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
          • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責任。
          • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權(quán)利。
          企業(yè)未開通此功能
          詳詢客服 : 0571-87858618
          山西省| 乐清市| 英山县| 图片| 福泉市| 泾川县| 屏南县| 微山县| 莲花县| 澎湖县| 自贡市| 纳雍县| 吉木萨尔县| 镇平县| 郸城县| 通海县| 东明县| 偃师市| 古田县| 博客| 苍梧县| 边坝县| 南丰县| 鹰潭市| 莲花县| 泾川县| 师宗县| 安乡县| 淮阳县| 桂平市| 东源县| 融水| 大安市| 太仆寺旗| 敖汉旗| 长乐市| 苏尼特右旗| 珲春市| 吉木萨尔县| 宜兰县| 江安县|