一、系統(tǒng)準備
開啟 Gentle Flex Pro 全封閉大體積細胞處理系統(tǒng)的電源,等待系統(tǒng)自檢完成。確保系統(tǒng)各部件顯示正常,無任何故障提示信息。
檢查系統(tǒng)的連接管路,確認管路連接緊密、無松動、無破損或泄漏現象。查看所有的閥門是否處于正常關閉或開啟狀態(tài),根據即將進行的細胞處理流程預先設置好相關閥門的初始狀態(tài)。
準備好所需的一次性耗材,如細胞處理袋、轉移管路等,并仔細檢查其完整性和無菌性。將合格的耗材按照系統(tǒng)操作規(guī)程正確安裝到相應的位置,確保安裝牢固且連接部位密封良好。
二、細胞樣本導入
在生物安全柜或無菌操作環(huán)境下,將待處理的細胞樣本轉移至專門的樣本導入容器(如樣本袋或注射器)中。確保樣本容器與 Gentle Flex Pro 系統(tǒng)的樣本入口管路連接緊密且無菌對接。
開啟樣本導入相關的閥門和泵,設定合適的流速,將細胞樣本緩慢、均勻地導入到系統(tǒng)的細胞處理腔室或初始處理袋中。在導入過程中,密切關注系統(tǒng)顯示屏上顯示的樣本導入量和流速信息,防止樣本溢出或導入不。
三、細胞分離與富集
根據細胞處理的目的,選擇合適的分離或富集程序。例如,如果是進行白細胞分離,在系統(tǒng)操作界面上選擇對應的白細胞分離模式,并設置相關參數,如離心速度、時間、溫度等。
啟動細胞分離或富集程序,系統(tǒng)將自動控制內部的離心裝置、閥門和泵等部件協同工作。在離心過程中,細胞會根據其密度差異在處理袋或離心管內分層。
當離心完成后,系統(tǒng)會按照預設的程序將目標細胞層轉移至特定的收集容器或處理袋中。此時,操作人員需密切觀察細胞轉移過程,確保轉移的準確性和完整性,避免其他雜質或非目標細胞的混入。
四、細胞清洗與置換
將預先準備好的清洗液或置換液連接至系統(tǒng)的相應入口管路。在操作界面上設定清洗或置換的參數,包括清洗液的種類、體積、流速以及清洗次數等。
啟動清洗或置換程序,系統(tǒng)會自動將清洗液或置換液引入細胞處理區(qū)域,與細胞充分混合后,再通過離心或過濾等方式去除廢液,重復該過程直至達到設定的清洗或置換要求。在清洗過程中,注意觀察細胞的狀態(tài)和清洗液的殘留情況,確保細胞得到有效清洗且無過多清洗液殘留影響細胞活性。
五、細胞培養(yǎng)與擴增(如有需要)
若細胞處理流程包含培養(yǎng)與擴增環(huán)節(jié),在完成細胞清洗與置換后,將含有細胞的處理袋或容器轉移至 Gentle Flex Pro 系統(tǒng)的培養(yǎng)模塊(若有)或連接至外部的細胞培養(yǎng)裝置。
向培養(yǎng)系統(tǒng)中添加適量的培養(yǎng)基,根據細胞類型和培養(yǎng)要求設置合適的培養(yǎng)條件,如溫度、濕度、二氧化碳濃度、攪拌速度(如適用)等。
定期對細胞培養(yǎng)狀態(tài)進行監(jiān)測,可通過系統(tǒng)自帶的監(jiān)測裝置(如細胞計數傳感器、代謝產物監(jiān)測儀等)或外部檢測設備獲取細胞密度、活力、代謝產物濃度等信息。根據監(jiān)測結果,適時調整培養(yǎng)條件或進行培養(yǎng)基的更換、細胞傳代等操作。
六、細胞收獲與輸出
當細胞培養(yǎng)或處理達到預期目標后,準備進行細胞收獲。在系統(tǒng)操作界面上選擇細胞收獲程序,并設置收獲的相關參數,如收獲體積、收獲速度等。
啟動收獲程序,系統(tǒng)將自動將處理后的細胞轉移至預先準備好的收獲容器中,如細胞凍存袋、離心管或注射器等。在收獲過程中,確保收獲容器的無菌性和密封性,防止細胞受到污染或泄漏。
收獲完成后,對細胞收獲容器進行標記,注明細胞種類、處理批次、收獲日期等信息。將收獲的細胞按照相應的要求進行后續(xù)處理,如低溫保存、進一步分析或應用于實驗研究、臨床治療等。
七、系統(tǒng)清潔與維護
在完成細胞處理操作后,立即對 Gentle Flex Pro 系統(tǒng)進行清潔。首先,使用專用的清洗液對系統(tǒng)內部的管路、處理腔室、閥門等部件進行沖洗,去除殘留的細胞、培養(yǎng)基、清洗液等雜質。
按照系統(tǒng)的維護手冊要求,定期對系統(tǒng)的關鍵部件進行檢查、保養(yǎng)和校準。例如,對離心裝置的轉子進行平衡檢查和清潔,對泵的流量精度進行校準,對傳感器進行靈敏度檢測和清潔等。
對系統(tǒng)的外部表面進行清潔和消毒,使用合適的消毒劑擦拭外殼、操作面板、顯示屏等部位,確保系統(tǒng)的整體清潔和衛(wèi)生,為下一次細胞處理操作做好準備。同時,記錄系統(tǒng)的清潔與維護情況,包括維護日期、維護內容、維護人員等信息,以便追溯和管理。
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