低聚半乳糖(GOS)是一種功能性低聚糖,嬰兒體內的雙歧桿菌菌群的建立很大程度上依賴于母乳中的GOS成分。因此,GOS被廣泛添加到嬰幼兒食品中,以促進嬰兒的健康發(fā)育。根據GB 5009.289-2023,食品中低聚半乳糖的測定方法是高效液相色譜法。
實驗原理是:試樣中的低聚半乳糖(n為2~7)經水溶液提取、2-氨基苯甲酰胺衍生,用淀粉葡糖苷酶酶解去除麥芽糊精、淀粉干擾后,用高效液相色譜-熒光檢測器檢測。采集的色譜峰根據用相同試驗條件下液相色譜串聯質譜法確定的相同聚合度的低聚半乳糖的保留時間定性,采用相對應聚合度和相對分子質量的麥芽糖類聚糖標準物質外標法定量,扣除乳糖、麥芽糖含量后,得出低聚半乳糖含量。
實驗涉及標準溶液的配置:
1.標準儲備液(10.00mg/mL):分別準確稱取100mg(精確至0.1mg)的乳糖、麥芽糖、麥芽三糖、麥芽四糖、麥芽五糖、麥芽六糖、麥芽七糖標準品,用水溶解并定容至10mL,混勻。將各標準儲備液轉移至儲液瓶中,于4℃保存,保存期1個月。
2.混合標準中間液(1.000mg/mL):用Miragen電動移液器吸取各標準儲備液(10.00mg/mL)1.00mL于10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻。臨用現配。
3.混合標準使用液(100.0μg/mL):用Miragen電動移液器吸取混合標準中間液(1.000mg/mL)1.00 mL于10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻。臨用現配。
4.混合標準系列工作液:用10mL規(guī)格的Miragen,單吸多排模式設置設置3個體積為1.00、2.50、5.00 mL(程序可存儲和調用),然后按分液鍵,將3個體積的混合標準中間液(1.000mg/mL)分別加入10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻;再用5mL規(guī)格的Miragen設置(或調用)3個體積為0.10、1.00、5.00mL,將3個體積的混合標準使用液(100.0μg/mL)分別加入10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻?;旌蠘藴氏盗泄ぷ饕旱馁|量濃度分別為1.000、10.00、50.00,100.0、250.0μg/mL和500.0μg/mL。臨用現配。
移取液體的一般是量筒和移液管,存在三個缺點:一是敞口操作,對強腐蝕、有毒有害、揮發(fā)性的液體,存在安全隱患;二是操作上環(huán)節(jié)多,需目視確認凹液面,實現精度難以保證;三是效率較低,無法滿足日益增加的液體移取的工作需求。
Miragen電動移液器,數值靠設定或選定,電機控制活塞運動,吸液和排液也更加穩(wěn)定,還有步驟少、調數快、模式多等諸多優(yōu)勢。Miragen電動移液器可給電機多段信號,從而達到吸液和排液分次數且各段體積可調,可實現單吸多排、多吸單排等效果,程序還可存儲和調用,更加可靠、便捷。
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