如何讓支原體遠離你的細胞
據(jù)粗略估計,大約三分之一的細胞培養(yǎng)物都感染了支原體。這些小東西神不知鬼不覺,侵入你的細胞。由于它們體積小,生長緩慢,所以難以察覺。但是,它們的存在又確實改變了細胞的代謝過程,繼而干擾你的實驗結(jié)果,或造成無法解釋的差異。更糟的是,拯救被感染的細胞幾乎是不可能的任務(wù)。因此,就支原體污染而言,預(yù)防是**要務(wù)。
細胞來源是關(guān)鍵
支原體污染的*常見原因之一是引入的培養(yǎng)物已經(jīng)被感染。一旦進入實驗室,這些小東西會蔓延到每個角落,讓你崩潰。要避免這種情況,*簡單的辦法就是不從其他實驗室要細胞,而從供應(yīng)商或菌種保藏中心(ATCC或ECACC)購買,這些細胞經(jīng)過嚴(yán)格檢測,確保不含有支原體。
如果購買有難度,或基于其他原因,不得不使用其他實驗室的細胞,那么也要保持警惕,在單獨的培養(yǎng)箱中隔離,同時進行支原體的檢測。市場上有多家公司提供支原體檢測試劑盒,你可自行選擇。
定期檢測很重要
即使實驗室沒有新來的細胞,支原體也可能通過操作人員傳遞到現(xiàn)有的培養(yǎng)物。當(dāng)然,操作人員并不知道。支原體污染的另一條路線是通過你的細胞培養(yǎng)試劑。培養(yǎng)基、酶這些常用試劑,也有可能被支原體污染。
盡管無法避免人或試劑的污染,但常規(guī)檢測也能避免情況惡化。也許,當(dāng)支原體初次感染時,我們未必能檢測到,但盡早發(fā)現(xiàn),就能防止這種微生物的傳播,避免大的損失。
支原體檢測有很多種。直接培養(yǎng)方法雖然準(zhǔn)確率高,但需要三到四周的時間。因此,我們在常規(guī)檢測中使用間接檢測方法已足夠,若發(fā)現(xiàn)陽性,則后續(xù)可采用較為繁瑣的直接檢測。常見的間接檢測方法有基于酶活性的熒光和生化分析、PCR分析、**分析等。
無菌操作要做好
支原體污染的另一個主要源頭是無菌操作不佳。盡管良好的操作可能是*簡單的預(yù)防措施,但說起來容易,做起來難。每個人都會犯錯,特別是在重復(fù)勞動時。因此,實驗室應(yīng)不定期開展培訓(xùn)和監(jiān)督,以便讓每個人都充分認(rèn)識到支原體的破壞性。
許多實驗室目前仍使用***,但細胞培養(yǎng)人員逐漸認(rèn)識到這是不負(fù)責(zé)任的,因為它帶來了耐藥微生物的問題。相反,*好依賴自身的無菌操作來預(yù)防支原體,而只有在懷疑或確認(rèn)感染的時候才使用***。
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