四環(huán)素類抗生素為廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌、立克次氏體等均有抑制作用。四環(huán)素類藥物進(jìn)入水產(chǎn)品領(lǐng)域已有多年，該類藥物的濫用會(huì)給食品安全帶來(lái)隱患。

根據(jù)GB 31656.11-2021，測(cè)定水產(chǎn)品中土霉素、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素殘留量的其中一法為高效液相色譜法。其試驗(yàn)涉及標(biāo)準(zhǔn)溶液配制，內(nèi)容如下：

1. 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100μg/mL)：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇解釋定容配制成土霉素、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素濃度均為100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。-18℃以下避光儲(chǔ)存，有效期1個(gè)月。

2. 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液:用Miragen電動(dòng)移液器分別準(zhǔn)確移取土霉素、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0、1.0、2.0、2.0mL于100mL容量瓶，用甲醇釋并定容，配制成土霉素、四環(huán)素、金霉素和多西環(huán)素濃度分別為1.0、1.0、2.0、2.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。-18℃以下避光儲(chǔ)存有效期為7d。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的備制

準(zhǔn)備4個(gè)10mL的容量瓶，采用opus電子瓶口分配器（10mL款）的stepper模式，設(shè)置分液體積0.5、1、2、5mL，然后排氣泡進(jìn)行分液。4個(gè)體積的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液分別加入4個(gè)容量瓶中。

用甲醇-咪唑緩沖溶液定容至刻度，加上已有的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，可得土霉素和四環(huán)素濃度分別為50，100，200，500，1000ng/mL，金霉素和多西環(huán)素濃度分別為100，200，400，1000，2000ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液供高效液相色譜測(cè)定。以待測(cè)物峰面積為縱坐標(biāo)、相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。

實(shí)驗(yàn)室移取幾微升到幾毫升的液體，一般采用移液器。Miragen電動(dòng)移液器，數(shù)值靠設(shè)定或選定，電機(jī)控制活塞運(yùn)動(dòng)。吸液和排液可分次數(shù)且各段體積可調(diào)，分液程序可儲(chǔ)存，可實(shí)現(xiàn)單吸多排、多吸單排等效果，有步驟少、更穩(wěn)定、調(diào)數(shù)快、模式多等諸多優(yōu)勢(shì)，可用于移液、灌裝、逐滴補(bǔ)液，代替手動(dòng)移液器、部分移液管和滴管。

德國(guó)赫施曼的opus分液系列產(chǎn)品，可自動(dòng)連續(xù)分液，且分液次數(shù)、間隔時(shí)間和流速均可調(diào)，既可進(jìn)行基礎(chǔ)的等體積分液，也可進(jìn)行不等體積分液（每個(gè)體積均獨(dú)立可調(diào)，如分5次，體積分別為1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL），單次分液量最小10uL，最da500mL，可用于大批量移液、稀釋劑補(bǔ)液（代替燒杯和玻璃棒），還可代替量筒、移液器和部分移液管。

赫施曼opus分液系列產(chǎn)品可與Miragen電動(dòng)移液器配合進(jìn)行快速的梯度稀釋，也可以配合容量瓶滿足更高精度要求的精密稀釋，與常規(guī)的稀釋操作相比，讓稀釋配液更加簡(jiǎn)單、便捷、可靠！