蛋白印跡膜再生液實(shí)際操作技巧和注意事項(xiàng)
蛋白印跡膜再生液說(shuō)明書
Stripping Buffer
目錄號(hào):K0056
保存條件:室溫(15-25℃)保存。
規(guī)格說(shuō)明
Cat. No. K0056 K0056A
Volume 100 ml 500 ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品采用溫和洗滌配方,可在不影響目的蛋白的情況下,去除結(jié)合在印跡膜上
的一抗和二抗,使同一張膜可進(jìn)行多次抗體檢測(cè),無(wú)需反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜,節(jié)省樣品和
時(shí)間,適用于使用NC或PVDF膜進(jìn)行Western Blot檢測(cè)時(shí)條件的優(yōu)化或同一樣品不同蛋
白的檢測(cè)。
本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途
注意事項(xiàng)
1.建議先檢測(cè)表達(dá)量較低的目的蛋白,用再生液處理后檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白,如內(nèi)參蛋白等。
2.請(qǐng)佩戴手套操作。
操作步驟
1.將曝光后的膜取出,加入適量的再生液(再生液充分覆蓋膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15 ml左右再生液),室溫振搖孵育15分鐘左右(孵育時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同的目的蛋白來(lái)調(diào)整:比如內(nèi)參抗體等表達(dá)量較高的蛋白,使用再生液時(shí)可以延長(zhǎng)孵育時(shí)間至1小時(shí)或者在37℃孵育30分鐘)。
2.棄去再生液,用15 ml緩沖液(PBST或TBST)洗膜3次,每次5 分鐘,室溫振搖。
3.為了檢測(cè)酶標(biāo)二抗洗脫是否*,此時(shí)可以用顯色方法來(lái)確定二抗是否洗脫掉。
4.待檢測(cè)完畢,確認(rèn)膜上無(wú)殘留的酶活性,再生后的膜通過(guò)加入15 ml的封閉液進(jìn)行封閉,室溫30分鐘或者4℃封閉過(guò)夜。
5.重新加入待測(cè)一抗,進(jìn)行下一輪的WB實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
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