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死體積對柱效的影響
閱讀：11403發(fā)布時間：2012-3-30
我們可以設想這樣一個場景，在一條湍急的河流中倒入一瓶墨水，墨水首會是一個小小的點，漸漸順水流而行一點點擴散，而到下游的時候肯定已不再是一個點，而是一個寬寬的譜帶了。這個現(xiàn)象*適用于HPLC的分析，試想樣品由進樣器起步為一個小小的點，流經(jīng)管路和色譜柱，當?shù)竭_檢測池時必然也像墨水一樣不可避免的有擴散，如果擴散小那么色譜圖中峰寬就小，擴散大峰寬也大。為了得到較小的理想峰寬，我們就不得不討論到一個常見的術語——死體積。
液相中的死體積，是指不被固定相滯留的組分，從進樣到其出現(xiàn)zui大峰值時，所消耗流動相的體積。死體積包括三個部分：進樣器至色譜柱管路及色譜柱出口管路的體積；色譜柱內(nèi)固定相顆粒間的間隙（被流動相所占據(jù)，Vm）；的體積；檢測器流動池的體積。本文中重點討論系統(tǒng)管路對色譜峰寬的影響。
就像小河一樣，如果河流窄的話，墨水肯定擴散就小，同樣，液相系統(tǒng)管路細，擴散就小。那么管路的粗細到底對譜圖的結果有多大的影響，筆者在長期檢驗色譜柱柱效的工作中有過這樣的經(jīng)歷：把進樣器到色譜柱這一段管路，內(nèi)徑由0.25mm更換成0.5mm，筆者發(fā)現(xiàn)本來柱效合格的色譜柱變的遠遠低于合格標準，即由80000N/m的柱效下降到了50000N/m，如下圖，峰展寬明顯。
而0.5mm在液相色譜系統(tǒng)中其常見，一般多用于壓泵出口到進樣器這一段，可以降低系統(tǒng)壓力。而進樣器之后則盡可能選擇較細的管路。
因此，為避免柱效降低及峰展寬的發(fā)生，應盡量減少連接管路的長度，縮小連接管路的直徑，減少系統(tǒng)中的死體積。
上面都為筆者工作中小小心得，有不科學的地方希望同行能給予指正，共同進步。
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