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氣相色譜法

　　此方法測得的是食物中各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。樣品處理簡單，快速；方法準(zhǔn)確，靈敏度高。

　　1.原理
　　氣相色譜法是利用色譜柱中裝入擔(dān)體及固定液，用載氣把欲分析的混合物帶入色譜柱，在一定的溫度與壓力條件下，各氣體組分在載氣和固定液薄膜的氣液兩相相中的分配系數(shù)不同，隨著載氣的向前流動(dòng)，樣品各組分在氣，液兩相中反復(fù)進(jìn)行分配，使脂肪酸各組分的移動(dòng)速度有快有慢，從而可將各組分分離開。然后進(jìn)行分別測定。

　　2.適用范圍
　　此法適用于食物中脂肪酸的分析。

　　3.儀器
　　氣相色譜儀（GC-7800）
　　氫火焰離子化檢測器
　　氮?dú)?nbsp;、氫氣、壓縮空氣
　　微處理機(jī)
　　色譜柱2m×4mm或3m×4mm填充80--100目ChromosorbW，涂以8% 或10%（W/W）二乙二醇琥珀酸酯（DEGS）
　　氣相色譜條件
　　柱溫:210℃
　　進(jìn)樣器溫度：280℃
　　檢測器溫度：280℃
　　氮?dú)饬魉伲?font face="草檀齋毛澤東字體">40ml/cm2

　　4.試劑
　　所有試劑，如未注明規(guī)格，均指優(yōu)級純，所有實(shí)驗(yàn)用水，均為蒸餾水。
　?。?font face="草檀齋毛澤東字體">1）石油醚（沸程30～60℃）分析純
　?。?font face="草檀齋毛澤東字體">2）苯
　　（3）無水甲醇
　?。?font face="草檀齋毛澤東字體">4）0.4mol/L氫氧化鉀--甲醇溶液：稱2.24g氫氧化鉀溶于少許甲醇中，然后用甲醇稀釋到10ml。
　?。?font face="草檀齋毛澤東字體">5）脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)（SIGMA）
　　（6） 脂肪酸混合標(biāo)準(zhǔn)
　　CHAIN %BYWT
　　6:0 1.0
　　8:0 5.0
　　10:0 4.0
　　12:0 27.0
　　14:0 10.0
　　16:0 10.0
　　18:0 2.0
　　18:1 15.0
　　18:2 25.0
　　18:3 1.0

　　5.操作步驟
　　稱取30--100mg（約2-6滴） 油脂，置入10ml量瓶內(nèi)，加入1-2ml 30~60℃沸程石油醚和苯的混合溶劑（1：1），輕輕搖動(dòng)使油脂溶解。加入1-2ml 0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液，混勻。在室溫靜置5～10分鐘后，加蒸餾水使全部石油醚苯甲酯溶液升至瓶頸上部，放置待澄清。如上清液渾濁而又急待分析時(shí)，可滴入數(shù)滴無水乙醇，1-2分鐘內(nèi)即可澄清。吸取上清液，在室溫下吹入氮使?jié)饪s，所得到濃縮液即可用于氣層分析。

　　6.結(jié)果計(jì)算
　　在有微處理機(jī)的情況下，用歸一化計(jì)算法則可自動(dòng)打印出峰面積和各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。歸一化計(jì)算法不能直接計(jì)算脂肪酸的總重量及各種脂肪酸的實(shí)際含量。

　　7.注意事項(xiàng)
　　同一樣品的兩次測定值之差不得超過兩次測定平均值的5%。