BTX細(xì)胞電穿孔儀
美國(guó)較有名BTX是專(zhuān)業(yè)的細(xì)胞融合、電穿孔儀的生產(chǎn)廠家。自從1983年起，苛求的科研工作者就已經(jīng)把BTX產(chǎn)品作為電融合、轉(zhuǎn)基因等應(yīng)用領(lǐng)域的*儀器。除了占世界的電融合、轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)外，BTX的產(chǎn)品還包括多達(dá)25種相關(guān)的配件，其中有多種專(zhuān)業(yè)的電極，給用戶(hù)更多的選擇。

美國(guó)較有名BTX是專(zhuān)業(yè)的細(xì)胞融合、電穿孔儀的生產(chǎn)廠家。ECM系列產(chǎn)品在轉(zhuǎn)基因的應(yīng)用領(lǐng)域中得以廣泛的應(yīng)用，其無(wú)以倫比的高性能得到了同行的厚愛(ài)。BTX的系列產(chǎn)品適用于動(dòng)植物、細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物、人類(lèi)細(xì)胞（包括活體細(xì)胞）的轉(zhuǎn)基因等操作，操作方法可參照相關(guān)文獻(xiàn)，及向廠商索要。
ECM630型BTX細(xì)胞電穿孔儀是多才多藝型細(xì)胞轉(zhuǎn)基因儀，適應(yīng)于各類(lèi)細(xì)胞。

BTX細(xì)胞電穿孔儀應(yīng)用舉例：
10-500V電壓：適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞，植物細(xì)胞
50-2500V電壓：適用于細(xì)菌、酵母各種型號(hào)，均有多種脈沖選擇
1、細(xì)菌/酵母轉(zhuǎn)化 （系統(tǒng)：ECM399/630）
電穿孔現(xiàn)在被認(rèn)作是轉(zhuǎn)化細(xì)菌及酵母的zui有效的方法。革蘭氏陰性細(xì)菌（例如大腸桿菌）一般比革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌更容易轉(zhuǎn)化，因?yàn)樗麄兊募?xì)胞壁組成不同。對(duì)于革蘭氏陰性細(xì)菌常?？梢垣@得10的10次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA的轉(zhuǎn)化效率，而對(duì)于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，一般可以得到10的6次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA。Chang等人（1997）成功對(duì)一個(gè)mtz-敏感的Heliobacter pylori菌株進(jìn)行電穿孔以傳遞mtz抵抗性。Planelles等人（1999）使用電穿孔轉(zhuǎn)化大腸桿菌，以避免使用包裝物質(zhì)。電穿孔儀器方面的進(jìn)展將使研究人員能夠進(jìn)一步優(yōu)化細(xì)菌轉(zhuǎn)化（例如脈沖長(zhǎng)度產(chǎn)生方面擴(kuò)展的功能條件）。

RNA、DNA、蛋白質(zhì)以及小分子都已經(jīng)通過(guò)電穿孔的方法轉(zhuǎn)入酵母。沒(méi)有必要在電穿孔前部分去除酵母細(xì)胞壁，因?yàn)樵谕暾湍鸽姶┛追矫娴倪M(jìn)展可以產(chǎn)生高的轉(zhuǎn)化率。Faber等人（1994）年優(yōu)化了S.Cerevisiae的實(shí)驗(yàn)方案，使用Hansenula Polymorpha獲得了比以前的報(bào)告增加300倍的轉(zhuǎn)化效率。

在質(zhì)粒修復(fù)中，質(zhì)粒從酵母轉(zhuǎn)入大腸桿菌以進(jìn)行詳細(xì)的DNA序列分析，這是另外一種重要的技術(shù)。這種兩個(gè)步驟的過(guò)程被電穿孔進(jìn)行了簡(jiǎn)化，用于驗(yàn)證隱性基因的結(jié)構(gòu)，將其導(dǎo)入酵母，看基因性和表現(xiàn)性之間的關(guān)系。已經(jīng)建立了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)方案使用指數(shù)衰減波發(fā)生器例如BTX ECM630轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。使用方形波電穿孔儀的實(shí)驗(yàn)方案，例如BTX ECM830，來(lái)轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。研究人員還成功將大的質(zhì)粒（BAC及YAC）導(dǎo)入細(xì)菌。電穿孔杯是細(xì)胞及酵母電穿孔的zui常用附件，而Model747共軸電極使用則變得越來(lái)越普遍。

2、動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染 （系統(tǒng)：ECM630/830）
對(duì)真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染可以通過(guò)多種方法獲得，例如磷酸鈣沉淀、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、病毒方法以及電穿孔。電穿孔已經(jīng)被正式對(duì)傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法不靈的細(xì)胞有很好的效果，因此被選為*的分子傳遞系統(tǒng)。電穿孔的好處有可重復(fù)性、更高的效率、大量樣本處理、無(wú)毒性以及容易使用（不需要孵育時(shí)間）。
Lofin等人（1999）對(duì)NIH/3T3細(xì)胞進(jìn)行電穿孔使mRNA進(jìn)入，以研究細(xì)胞周期及細(xì)胞分化過(guò)程中mRNA對(duì)基因表達(dá)調(diào)節(jié)、控制。Bodwell等人（1999）在對(duì)COS-7細(xì)胞進(jìn)行電穿孔是使用較長(zhǎng)的脈沖時(shí)間后獲得了較高水平的表達(dá)。Warner等人（1997）使用電穿孔方法成功轉(zhuǎn)化了淋巴細(xì)胞。Incyte Genomics公司成功使用BTX電穿孔儀轉(zhuǎn)染了ES細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因小鼠的生產(chǎn)。BTX ECM399\630\830型儀器、電穿孔杯以及多種特用的電極都用于動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染用途。

3、蛋白質(zhì)電整合/電插入 （系統(tǒng)：ECM630/830）
將蛋白質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞以及將蛋白質(zhì)插入至細(xì)胞膜中也可以通過(guò)電穿孔來(lái)實(shí)現(xiàn)。不光肽段，而且包括抗體的多種蛋白，也可以進(jìn)行導(dǎo)入。Ushio-Fukai等人（1998）對(duì)電穿孔插入哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的外源蛋白進(jìn)行了定量。對(duì)于這些用途可以使用多種BTX電極。

4、植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化 （系統(tǒng)：ECM630/830）
對(duì)植物原生質(zhì)（玉米、煙草等）及完整植物的電穿孔可以用于產(chǎn)生對(duì)農(nóng)業(yè)/園藝有用的轉(zhuǎn)基因作物。植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化的一個(gè)主要目的是對(duì)植物細(xì)胞進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)化以產(chǎn)生具有優(yōu)良品質(zhì)及產(chǎn)量增加的作物。Lin等人（1997）優(yōu)化了多種植物上用于GUS表達(dá)的電穿孔條件，結(jié)果顯示完整植物細(xì)胞以及原生質(zhì)都可以進(jìn)行有效轉(zhuǎn)化。Diaz等人（1994）針對(duì)小麥及燕麥的葉和根的原生質(zhì)進(jìn)行了相似的優(yōu)化試驗(yàn)，證明了電穿孔對(duì)于植物工作的有效性。這些作者也比較了電穿孔與PEG的差別，結(jié)果發(fā)現(xiàn)電穿孔更有效、更有重復(fù)性、更經(jīng)濟(jì)。BTX是世界上體內(nèi)轉(zhuǎn)染用特殊電極的者。對(duì)于這些用途可以使用多種BTX電極，例如2針陣列、游標(biāo)尺電極 、以及Tweezertrodes。
5、貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染----ACT （系統(tǒng)：ECM630/830）
除了對(duì)盛在普通樣品杯的懸浮細(xì)胞進(jìn)行電穿孔外，還可以對(duì)多種培養(yǎng)板上的貼壁細(xì)胞進(jìn)行原位電穿孔。這樣可以避免用*酶消化細(xì)胞，有助于保持細(xì)胞的活性及細(xì)胞數(shù)目。Lewis等人（1999）使用培養(yǎng)皿電極將基因轉(zhuǎn)染入人類(lèi)及靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。Paptis等人（1998）通過(guò)對(duì)長(zhǎng)在導(dǎo)電載玻片的NIH/3T3細(xì)胞進(jìn)行原位電穿孔研究信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Teruel等人（1999）也對(duì)位于載玻片上的海馬神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)入DNA、RNA以及多種大分子。BTX為貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染（ACT）提供了PP35-2、366、747、840及Epizap電極系統(tǒng)。請(qǐng)關(guān)注不久后為這些用途開(kāi)發(fā)的新產(chǎn)品

6、高通量篩檢----HTS （系統(tǒng)：ECM630/830）
高通量篩檢及cDNA文庫(kù)的建立，需要一次處理多個(gè)樣本的能力。使用傳統(tǒng)樣品杯花費(fèi)很大而且有時(shí)間限制。然而，96孔板里使用的電極對(duì)于這些類(lèi)型的應(yīng)用肯定有用。Hoffma-Tsay等人（1994）使用96孔共軸電極在植物融合實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)8種化學(xué)物質(zhì)。Peterfy等人（1995）比較了多種類(lèi)型的多孔電極，將DNA傳遞入COS-7細(xì)胞。Marrero等人（1997）使用多孔電極將抗體電導(dǎo)入血管平滑肌細(xì)胞，以誘導(dǎo)細(xì)胞增值。BTX目前提供747和840用于這樣的用途，并且不斷開(kāi)發(fā)新的產(chǎn)品。

7、大容量生產(chǎn)（LVP）及先體外后體內(nèi)基因治療 （系統(tǒng)：ECM600F）
工業(yè)用大容量生產(chǎn)或者先體外后體內(nèi)基因治療也為社會(huì)所需。人們可以先在樣品杯里優(yōu)化條件然后將實(shí)驗(yàn)方案轉(zhuǎn)成流水線作業(yè)，將實(shí)驗(yàn)進(jìn)行比例放大。BTX ElectroFlowPorator系統(tǒng)有一個(gè)泵及一個(gè)改進(jìn)了的電穿孔儀組成。泵可以進(jìn)行編程并與電穿孔儀進(jìn)行同步操作，以將脈沖傳遞多批的細(xì)胞。Parham等人(1999)使用流動(dòng)性系統(tǒng)優(yōu)化了CHO、COS-7、HEK293、NSO、CV-1細(xì)胞的短暫基因表達(dá)，，獲得了滿(mǎn)意的結(jié)果。

技術(shù)規(guī)格 工作狀況：
具有開(kāi)機(jī)自檢功能
接 口： 數(shù)字式用戶(hù)接口
輸入電壓： 110V/220VAC
充電時(shí)間： *長(zhǎng)5秒
電壓范圍： 10-500V低壓工作模式/每次1V調(diào)進(jìn)50-2500V高壓工作模式/每次調(diào)進(jìn)5V
電 容： 1μF，25μF-3275μF低壓工作模式每次25μF調(diào)進(jìn)25μF，50μF高壓工作模式
電 阻： 25-1575W調(diào)進(jìn)/每次25W調(diào)進(jìn)（高壓工作模式）
脈 沖： 低壓工作模式>8300RC時(shí)間常數(shù)
高壓工作模式>126RC時(shí)間常數(shù)
安 全： 抗短路保護(hù)*長(zhǎng)延遲10秒
其它指標(biāo)： 電流量：低壓工作模式限6000A
高壓工作模式限3000A
物理參數(shù)： 尺寸：12.5"×12.25" ×5.5"(W×D×H)
重量：10磅（4.5公斤）
顯示：20×4位LCD液晶顯示屏
控制器：旋轉(zhuǎn)式電壓選擇鈕按壓式電源開(kāi)關(guān)及乒乓式觸發(fā)開(kāi)關(guān)
監(jiān)測(cè)：能監(jiān)測(cè)電壓峰值Vp及RC充放電時(shí)間常數(shù)

BTX Molecular Delivery Systems is regarded as a pioneer in the field of molecular delivery utilizing electroporation and electrofusion technology.

BTX offers a comprehensive line of instruments and accessories for both electroporation and electrofusion of mammalian, bacterial, yeast, fungi, insect and plant cells and tissue. We specialize in providing research tools for novel cutting edge applications such as adherent cell electroporation, high-throughput cloning, large volume electroporation, in vivo gene delivery, in ovo gene delivery, and in & ex utero gene delivery.