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        1. 北京云肽生物科技有限公司
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          當(dāng)前位置:> 供求商機> TR-1003-G Merck 聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑

          TR-1003-G Merck 聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑
          • TR-1003-G  Merck 聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑
          舉報

          貨物所在地:北京北京市

          地: 德國

          更新時間:2024-09-10 15:38:48

          瀏覽次數(shù):38

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          Merck TR-1003-G 聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑 1ml,產(chǎn)品簡介:
          產(chǎn)品品牌:Merck
          產(chǎn)品貨號:TR-1003-G
          產(chǎn)品名稱:聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑
          產(chǎn)品規(guī)格:1ml

          Merck  TR-1003-G  聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑

           

          ?默克集團(Merck?是一家領(lǐng)xian的科技公司,專注于醫(yī)藥健康、生命科學(xué)和電子科技三大領(lǐng)域。公司成立于1668年,總部位于德國達姆施塔特。默克集團的業(yè)務(wù)范圍廣泛,包括醫(yī)藥健康、生命科學(xué)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,以及電子科技解決方案的提供。

           

          Merck  TR-1003-G  聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑  1ml,產(chǎn)品簡介:

          產(chǎn)品品牌:Merck

          產(chǎn)品貨號:TR-1003-G

          產(chǎn)品名稱:聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑

          產(chǎn)品規(guī)格:1ml

           

          Merck  TR-1003-G  聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑  1ml,產(chǎn)品說明:

          應(yīng)用

          聚凝胺是一種陽離子聚合物,可以大大提高逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒感染哺乳動物細胞的效率。 它起到中和病毒體與細胞表面之間電荷排斥的作用,從而提高感染效率。 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的效率在某些細胞中顯著提高了 100 1,000 倍,這是因為在感染過程中加入了聚凝胺。 含有 DMSO 的聚凝胺儲液還用于介導(dǎo) DNA 轉(zhuǎn)移到多種細胞類型中,例如 CHO、雞胚成纖維細胞、NINH-3T3 和髓樣細胞。

          方法:逆轉(zhuǎn)錄病毒感染

          重組逆轉(zhuǎn)錄病毒儲液是通過將 5ml 生長培養(yǎng)基(含 5% 血清)添加接近匯合的轉(zhuǎn)染的逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞單層細胞的 100mm 平板中來制備的。 24 小時后,去除培養(yǎng)基,并通過 0.45um 過濾器過濾。

          將要感染該重組逆轉(zhuǎn)錄病毒儲液的細胞以每個 100mm 平板 500,000 個細胞的量接種在 10ml wan全培養(yǎng)基中。

          24 小時后,去除細胞的生長培養(yǎng)基。 用 2ml 的病毒上清液(或?qū)⒉《緝σ合♂屩?span> 2ml)感染細胞,每毫升添加 5ug 10ug 的聚凝胺(最終濃度),在 37°C 下孵育細胞 3 6 小時。

          加入 8 ml wan全培養(yǎng)基。 感染三天后,將細胞按 15 的比例分進選擇培養(yǎng)基。

          方法:轉(zhuǎn)染

          將細胞鋪在wan全生長培養(yǎng)基中,約有 50% 匯合。

          鋪板后 18 24 小時,立即使用以下方法制備 DNA-培養(yǎng)基-聚凝胺溶液:

          注意:必須按照正確的順序添加每個組件。

          1wan全生長培養(yǎng)基(60mm 平板,2ml

          100mm 平板,3ml),加熱至 37°C。

          2:質(zhì)粒 DNA10ng 10ug。 輕輕混合。

          3:聚凝胺的最終濃度為每毫升 5ug 10ug。 輕輕混合

          從平板中去除培養(yǎng)基,并將 DNA-培養(yǎng)基-聚凝胺溶液添加到細胞中。 讓細胞在 37°C 下孵育 6 20 小時,前 6 個小時大約每 1.5 個小時輕輕搖動一次。

          去除 DNA-培養(yǎng)基-聚凝胺溶液,并用 DMSO 儲液輕輕覆蓋細胞(在 1X HBSS 中的 15 DMSO:專門培養(yǎng)基(貨號 S-051-D)每個 60 mm 平板 3 ml,每個 100 mm 平板 4 ml。 手動搖動培養(yǎng)皿 10 秒鐘,使溶液均勻分布,然后將細胞置于 37°C 下溫育 4 分鐘。

          立即去除 DMSO 儲液,并用wan全生長培養(yǎng)基輕輕沖洗細胞兩次,每個 60 mm 培養(yǎng)皿每次洗滌用 5 ml,每個 100 mm 培養(yǎng)皿每次洗滌用 10 ml

          wan全生長培養(yǎng)基添加到細胞中。

          若要獲得穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化子,則去除生長培養(yǎng)基,并將細胞按 15 比例分進選擇培養(yǎng)基。

          若要瞬時表達,去除生長培養(yǎng)基并添加新鮮的生長培養(yǎng)基。 24 72 小時后收獲細胞和/或培養(yǎng)基。

          提供的試劑通過0.2μm膜過濾并用無菌H2O水化。

          外形

          每毫升無菌超純水溶解 10mg 聚乙烯。

          儲存及穩(wěn)定性

          -20°C 可保存長達 2 年。

          免責(zé)聲明

          除非我們的產(chǎn)品目錄或產(chǎn)品附帶的其他公司文檔另有說明,否則我們的產(chǎn)品僅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未經(jīng)授權(quán)的商業(yè)用途、體外診斷用途、離體或體內(nèi)治療用途或任何類型的消費或應(yīng)用于人類或動物。

           

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          TR-1003-G  聚乙烯感染/轉(zhuǎn)染試劑  1ml

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