義翹神州 MCHOGSI-1L SuperNuclease核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒 SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng) 1L,產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品品牌:義翹神州
產(chǎn)品貨號(hào):MCHOGSI-1L
產(chǎn)品名稱(chēng):SuperNuclease核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:1L
義翹神州 MCHOGSI-1L SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)
北京義翹神州科技股份有限公司是一家從事生物試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售并提供技術(shù)服務(wù)的生物科技公司。所有產(chǎn)品都是自主研發(fā)和生產(chǎn)的,主要業(yè)務(wù)包括重組蛋白、抗體、基因和培養(yǎng)基等產(chǎn)品,以及重組蛋白、抗體的開(kāi)發(fā)和生物分析檢測(cè)等服務(wù),同時(shí)也為制藥公司或生物技術(shù)公司提供單克隆抗體候選藥物的臨床前規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)。義翹神州的產(chǎn)品能夠覆蓋生命科學(xué)研究的多個(gè)領(lǐng)域,為分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、干細(xì)胞研究等基礎(chǔ)科研方向和創(chuàng)新藥物研發(fā)提供“一站式"生物試劑產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。
義翹神州 MCHOGSI-1L SuperNuclease核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒 SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng) 1L,產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品品牌:義翹神州
產(chǎn)品貨號(hào):MCHOGSI-1L
產(chǎn)品名稱(chēng):SuperNuclease核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒 SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)
產(chǎn)品規(guī)格:1L
義翹神州 MCHOGSI-1L SuperNuclease核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒 SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng) 1L,產(chǎn)品說(shuō)明:
產(chǎn)品描述
SMM CHO-GSI 培養(yǎng)基主要是為提高CHO穩(wěn)定株的蛋白產(chǎn)量而開(kāi)發(fā)的,無(wú)血清,無(wú)動(dòng)物源成分的培養(yǎng)基。不含L-谷an酰an,使用時(shí)需加入4mM的L-谷an酰an。不含HT。推薦用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
蛋白表達(dá)量高,細(xì)胞生長(zhǎng)好,嚴(yán)格的質(zhì)控,批次穩(wěn)定性好。
產(chǎn)品用途
僅用于科學(xué)研究,不推薦用于人類(lèi)或動(dòng)物的診斷和治療。
儲(chǔ)存條件
2-8℃避光儲(chǔ)存12個(gè)月。
培養(yǎng)方法
(一)細(xì)胞復(fù)蘇
1.取出凍存管,迅速在37℃水浴鍋里融化,整個(gè)過(guò)程最好控制在1分鐘以?xún)?nèi)。
2. 輕輕地混勻細(xì)胞并全部移到50ml的離心管中,逐滴加入 5-8ml在37℃水浴鍋里預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)基。 100g,5min離心細(xì)胞。
3. 倒掉上清,用10-20mL在37℃水浴鍋里預(yù)熱好的新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,放到100mL培養(yǎng)瓶中。 然后將細(xì)胞放到37℃,5%的CO2恒溫?fù)u床中,110-175rpm培養(yǎng)。
4. 2-5天后取樣計(jì)數(shù)細(xì)胞密度和活率,如果細(xì)胞密度達(dá)到1.0X106cells/ml,則24進(jìn)行正常傳代培養(yǎng); 如果細(xì)胞密度低于1.0X106cells/m,則收集細(xì)胞進(jìn)行離心處理,100g,5min。 然后重懸到20-30ml已經(jīng)在37℃水浴鍋里孵育好的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
5. 細(xì)胞生長(zhǎng)正常后,傳代時(shí)起始密度控制在0.3X106cells/ml ,3-4天傳一次代。
注意事項(xiàng):凍存管融化速度越快越好; 由于剛復(fù)蘇的細(xì)胞比較脆弱,所以整個(gè)過(guò)程要輕以免損傷細(xì)胞。
(二)細(xì)胞傳代
1. 取樣計(jì)數(shù)細(xì)胞,計(jì)算細(xì)胞密度。
2. 按照起始細(xì)胞密度0.3-0.4X106cells/ml,計(jì)算所需細(xì)胞懸液和培養(yǎng)基的用量傳代,100ml的培養(yǎng)瓶中放15-20ml培養(yǎng)(或250ml的培養(yǎng)瓶放50-60ml培養(yǎng))。 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),5%CO2,搖床轉(zhuǎn)速:110-175rpm。
3. 每3-4天傳一次代,起始細(xì)胞密度傳到0.2-0.3X106細(xì)胞/ml。
如何使 CHO 穩(wěn)定的應(yīng)變細(xì)胞適應(yīng) SMM CHO-SI 培養(yǎng)基:
通常情況下,細(xì)胞不經(jīng)過(guò)馴化而能直接適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基,下面我們推薦2種方式來(lái)更換培養(yǎng)基:1)直接更換; 2)逐步更換。 首先選用的細(xì)胞要在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,同時(shí)細(xì)胞活率大于90%。
(三)直接更換
1. 細(xì)胞培養(yǎng)在加5-10%血清傳統(tǒng)的培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基里,直接稀釋傳代到SMM CHO-GSI培養(yǎng)基,細(xì)胞密度控制在0.3-0.4X106細(xì)胞/ml。
2.然后放入5%CO2、37℃的恒溫培養(yǎng)箱中,110-175rpm轉(zhuǎn)速條件下培養(yǎng)。
3. 3-5天后進(jìn)行傳代或者換液
4. 繼續(xù)傳代培養(yǎng),起始細(xì)胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml,直到wan全適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。
5. 經(jīng)過(guò)幾代在100%的 SMM CHO-GSI培養(yǎng)基中培養(yǎng),傳代后4-6天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3X106cells/ml,細(xì)胞活率大于90%。 這時(shí)說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)wan全適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。 注意: 如果直接更換沒(méi)有成功,則進(jìn)行逐步更換的方法養(yǎng)基。
注意: 如果直接更換沒(méi)有成功,則進(jìn)行逐步更換的方法
(四)逐步更換
1.細(xì)胞培養(yǎng)在加5-10%血清傳統(tǒng)的培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基里,稀釋傳代,細(xì)胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml,原培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為75:25。
2.然后放入5%CO2、37℃的恒溫培養(yǎng)箱中,110-175rpm。
3. 3-5天后進(jìn)行傳代,如果細(xì)胞生長(zhǎng)正常,則傳代時(shí)原培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為50:50. 細(xì)胞密度仍控制在0.3-0.4X106細(xì)胞/ml。
重復(fù)步驟3,逐漸增加SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例(25:75;原始培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為10:90),直到SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的100%。
5.在100%的SMM CHO-GSI培養(yǎng)基中,傳代后4-6天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3X106cells/ml,細(xì)胞活率大于90%。這時(shí)說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)wan全適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。
(五)凍存細(xì)胞
凍存細(xì)胞時(shí)CHO cells 要處在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期同時(shí)細(xì)胞活率在90%以上。
1.取樣計(jì)數(shù)細(xì)胞,根據(jù)凍存管數(shù)計(jì)算所用細(xì)胞懸液體積和凍存液的體積,比例如下:92.5%的培養(yǎng)基混合物(50% 的新鮮SMM CHO-GSI培養(yǎng)基+50% 條件SMM CHO-GSI培養(yǎng)基 )+ 7.5% DMSO,最終的細(xì)胞數(shù)為 5 x 106cells/ 管。
2.準(zhǔn)備相應(yīng)體積的凍存培養(yǎng)基:46.25% 的新鮮SMM CHO-GSI培養(yǎng)基 + 7.5% DMSO,放在4°C 備用。 凍存培養(yǎng)基最好為當(dāng)天配制。
3.通過(guò)100g,5-10min離心收集細(xì)胞,留46.25%條件培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,然后逐滴加入事先準(zhǔn)備好的放4°C 的凍存培養(yǎng)基。
4.混合均勻后分裝細(xì)胞到凍存管中,一般2ml的凍存管放1-1.5ml,貼好標(biāo)簽。
5.然后放到凍存盒中,放入-80°C 冰箱(每分鐘下降1°C)。
6.80℃冰箱中過(guò)夜放置(至少放置24小時(shí)),轉(zhuǎn)移細(xì)胞到液氮罐中,推薦儲(chǔ)存條件在-125°C to -200°C。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
MCHOGSI-1L SuperNuclease核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒 SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng) 1L