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MicroRNA Mimic Negative Control

MCE 國際站：MicroRNA Mimic Negative Control

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-R04602

純度：96.27%

存儲條件：-20°C, sealed storage, away from moisture *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產(chǎn)品活性：MicroRNA Mimic Negative Control是 21個核苷酸的 miRNA 模擬物，可作為陰性對照使用。MicroRNA Mimic Negative Control 的序列是根據(jù) cel-mir-239b的序列設(shè)計，這個序列是被廣泛作為陰性對照使用。它與人類、小鼠和大鼠的miRNA具有最小的序列一致性。

體外：1. miRNA的配制 1.1 miRNA產(chǎn)品呈透明或半透明的干膜狀附著在管壁上，使用前將試管瞬時離心，以確保 miRNA 位于試管底部。使用不含核酸酶的水重新配制 miRNA，得到20 μM的母液。 對于5 nmol miRNA：加入250 μL 無核酸酶水，渦旋振蕩數(shù)次溶解。 對于20 nmol miRNA：加入1000 μL 無核酸酶水，渦旋振蕩數(shù)次溶解。1.2 (可選) 將 miRNA 分裝到一個或多個管子中以減少凍融的次數(shù)（1.3 將配制好的母液在-20℃或-80℃條件下保存。 2. 準備細胞 2.1 預先接種細胞，待達到合適的細胞密度時進行細胞轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前細胞活力影響轉(zhuǎn)染結(jié)果。 3. 轉(zhuǎn)染 3.1 制備轉(zhuǎn)染混合物A和B注：對于 miRNA mimics，我們推薦的工作濃度為 50nM。miRNA 產(chǎn)品最佳工作濃度因不同的細胞類型及研究目的而異，這取決于miRNA、細胞系和選擇的分析方法。為了確定最佳結(jié)果的濃度，應該使用不同的濃度進行優(yōu)化實驗。優(yōu)化后的濃度范圍為 10~200nM。 6孔板的每孔：A: 245 μL無血清培養(yǎng)基+ 5 μL miRNA；B: 240 μL無血清培養(yǎng)基+ 10 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 12孔板的每孔：A: 97.5 μL無血清培養(yǎng)基+ 2.5 μL miRNA；B: 95 μL無血清培養(yǎng)基+ 5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 24孔板的每孔：A: 48.75 μL無血清培養(yǎng)基+ 1.25 μL miRNA；B: 47.5 μL無血清培養(yǎng)基+ 2.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 96孔板的每孔：A: 24.75 μL無血清培養(yǎng)基+ 0.25 μL miRNA；B: 24.5 μL無血清培養(yǎng)基+ 0.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 如果使用其他品牌的轉(zhuǎn)染試劑，需要根據(jù)具體情況調(diào)整轉(zhuǎn)染試劑加入的量。3.2 將稀釋好的 A 和 B 輕輕混合。室溫孵育15-20分鐘。3.3 從細胞中去除培養(yǎng)基，用 PBS 洗滌。3.4 向細胞中添加 miRNA-轉(zhuǎn)染試劑混合物。 6孔板的每孔：加入1500 μL不含血清的新鮮培養(yǎng)基，然后加入500 μL的轉(zhuǎn)染混合物 (A+B)，混勻。 12孔板的每孔：加入800 μL不含血清的新鮮培養(yǎng)基，然后加入200 μL的轉(zhuǎn)染混合物 (A+B)，混勻。 24孔板的每孔：加入400 μL不含血清的新鮮培養(yǎng)基，然后加入100 μL的轉(zhuǎn)染混合物 (A+B)，混勻。 96孔板的每孔：加入50 μL不含血清的新鮮培養(yǎng)基，然后加入50 μL的轉(zhuǎn)染混合物 (A+B)，混勻。3.5 在37℃孵育細胞1-3天。然后分析轉(zhuǎn)染細胞。可在轉(zhuǎn)染約 6 小時后將無雙抗和血清培養(yǎng)基更換為正常含血清和雙抗培養(yǎng)基。注：轉(zhuǎn)染時的培養(yǎng)基中不要加入抗生素，否則會降低細胞轉(zhuǎn)染的效率，甚至導致細胞死亡。 MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

種屬：Caenorhabditis elegans

銷售產(chǎn)品：Rasagiline  | Afatinib (dimaleate)  | Nicotiflorin  | TAK-285  | Perindopril (erbumine)  | L-Lysine hydrochloride  | Baloxavir marboxil  | Sophocarpine  | KOdiA-PC  | (-)-p-Bromotetramisole (oxalate)

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

參考文獻：

[1]. Xia W, Huang J, Sun C, Shen F, Yang K. MicroRNA?1224 inhibits cell proliferation by downregulating CBX3 expression in chordoma. Oncol Lett. 2024;27(6):262.