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1.實(shí)驗(yàn)前將所有試劑平衡至室溫,包括樣本、TMB(非常重要)。
2.強(qiáng)烈建議老師在操作的時候每個樣本包括標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔(請務(wù)必這樣操作),因?yàn)檫@樣可以:求平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性對試劑盒的性能進(jìn)行評估 對自己的操作進(jìn)行評估解決跳孔
3.為保證老師 ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確 ,其中幾點(diǎn)重要的操作注意事項(xiàng)請務(wù)必參考:如果以下表述與說明書中不一致,請按照實(shí)驗(yàn)對應(yīng)說明書的要求操作 。
1)標(biāo)準(zhǔn)品溶解:標(biāo)準(zhǔn)品溶解嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作,建議老師進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時,在EP管中進(jìn)行。
2)孵育:說明書中進(jìn)行孵育的時候,一定要用微孔板振蕩器振蕩,這個很重要,利于抗原抗體充分結(jié)合。
3)洗板:建議按照說明書操作,每次洗滌至少洗液浸泡30s,重復(fù)6次,洗板時間太短、次數(shù)太少會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)效果不佳,延長洗板時間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。
4)如何控制標(biāo)曲顯色(僅針對雙抗夾心法ELISA試劑盒)5 .30分鐘顯色時間為經(jīng)驗(yàn)范圍,每個具體的實(shí)驗(yàn),可根據(jù)以下情況,確定大致的顯色時間:
①肉眼觀察:標(biāo)曲S5孔有淡藍(lán)色、Blank孔無明顯藍(lán)色時,即可終止。
② 儀器判斷:630 nm左右波長下,ac標(biāo)曲S1孔的OD值達(dá)到0.5 - 0.7、S5孔的OD值達(dá)到0.05 - 0.08、Blank孔的OD值小于0.05時,即可終止。
③ 高敏系列試劑盒因靈敏度更高,需嚴(yán)格控制顯色時長,可較普通試劑盒適當(dāng)縮短顯色時間。
免責(zé)聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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