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1.將放在蔗糖溶液中的組織塊取出,放入20g L-1 蔗糖與OCT包埋劑1:1體積比例混合液中,室溫浸泡2h
2. 移入OCT包埋劑中室溫浸泡4h,更換新的OCT包埋劑,室溫浸泡6h.
3. 將標(biāo)本置于托物臺(tái),用恒冷箱切片機(jī)切片(一般-22℃),片厚10μm,貼于預(yù)處理的載玻片上,-20℃冰箱保存。
OCT冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已廣泛用于免疫組化實(shí)驗(yàn)室中,其用途是在冰凍切片時(shí)支撐組織,以增加組織的連續(xù)性,減少皺折及碎裂。
又因OCT混合物為水溶性,故在漂片時(shí)可溶于水,所以在以后的染色中不會(huì)增加背景染色。
利用OCT混合物(opti-mum cutting temperature compound)預(yù)先浸潤(rùn)組織,然后再進(jìn)行恒冷箱切片,使切片質(zhì)量得到改善。
另外,皮膚疾病中反應(yīng)在其病因發(fā)病機(jī)制中占很大比重,因此在皮膚活檢標(biāo)本診斷中顯示抗原或抗體是很重要的,一般使用冰凍切片直接免疫熒光法觀察切片標(biāo)本上熒光抗體染色結(jié)果作為抗原的鑒定和定位利用OCT混合物(opti-mum cutting temperature compound)預(yù)先浸潤(rùn)組織,然后再進(jìn)行恒冷箱切片,使切片質(zhì)量得到改善
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