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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復(fù)蘇/凍存人真皮微血管內(nèi)皮細胞

          人真皮微血管內(nèi)皮細胞
          • 人真皮微血管內(nèi)皮細胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 ATCC
          • 型號 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-09 11:36:59瀏覽次數(shù):286評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB0597h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 皮膚組織
          人真皮微血管內(nèi)皮細胞分離自真皮組織。真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細胞(M EC) 在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。

          人真皮微血管內(nèi)皮細胞

          產(chǎn)品名稱 :人真皮微血管內(nèi)皮細胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0597h

          組織來源 :皮膚組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


          細胞簡介:

          真皮微血管內(nèi)皮細胞分離自真皮組織。真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細胞(M EC) 在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。

          在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域,由于表皮細胞、真皮成纖維細胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。與之相比,對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內(nèi)皮細胞,則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。


          細胞特性

          1)細胞來源于手術(shù)切除的正常包皮組織。

          2)細胞鑒定:vWF免疫熒光染色為陽性。

          3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

          4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

          5)細胞生長方式:多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明膠(0. 1%)
          培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長特性 :貼壁
          細胞形態(tài) :內(nèi)皮細胞樣
          傳代特性 :可傳2-3代
          傳代比例 :1:2
          消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


          客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細胞消化
          1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細胞收貨脫落
          1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
          4. 細胞實驗

          因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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