血清高密度脂蛋白（High density lipoprotein cholesterol , HDL-C）試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法100管/96樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
高密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，運(yùn)載周?chē)M織中的膽固醇，再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過(guò)膽汁從腸道排出，是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護(hù)因子，俗稱(chēng)“血管清道夫"，對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。
測(cè)定原理：
用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過(guò)氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類(lèi)化合物；在500nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
離心機(jī)，恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。
試劑四：液體10mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，4℃保存。
樣品處理：
取血后3小時(shí)內(nèi)分離血清，將血清樣品與試劑一按照1:1的比例充分混勻，25℃靜置15min，2000g離心15min，上清置于冰上待測(cè)。
測(cè)定操作表：
空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 | |
蒸餾水（μL） | 4 | ||
標(biāo)準(zhǔn)品（μL） | 4 | ||
樣本（μL） | 4 | ||
試劑二（μL） | 150 | 150 | 150 |
試劑三（μL） | 50 | 50 | 50 |
混勻，37℃靜置30min，于1mL玻璃比色皿，空白管調(diào)零，測(cè)定500nm處吸光值A。分別記為A標(biāo)準(zhǔn)管和A測(cè)定管 | |||
計(jì)算公式：
a． 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
HDL-C含量（mmol/L）= A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管
=5×A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管
C標(biāo)準(zhǔn)管：5mmol/L
b．用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
HDL-C含量（mmol/L）= A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管
=5×A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管
C標(biāo)準(zhǔn)管：5mmol/L
注意事項(xiàng)：
1. 樣本切勿反復(fù)凍融，最好在取血后12小時(shí)內(nèi)完成測(cè)定。
2. 配置好的試劑三4℃保存可半個(gè)月。
3. 線性范圍為0.15mmol/L-3.8mmol/L。
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