血清低密度脂蛋白（Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C）試劑盒說明書
微量法100管/96樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
低密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān)，是脂類疾病分類和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測的一個重要指標(biāo)。
測定原理：
用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
離心機(jī)，恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。
試劑四：液體10mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，4℃保存。
樣品處理：
取血后3小時內(nèi)分離血清，將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻，25℃靜置15min，2000g離心15min，上清置于冰上待測。
測定操作表：
空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 | |
蒸餾水（μL） | 4 | ||
標(biāo)準(zhǔn)品（μL） | 4 | ||
樣本（μL） | 4 | ||
試劑二（μL） | 150 | 150 | 150 |
試劑三（μL） | 50 | 50 | 50 |
混勻，37℃靜置30min，于1mL玻璃比色皿，空白管調(diào)零，測定500nm處吸光值A。分別記為A標(biāo)準(zhǔn)管和A測定管 | |||
計(jì)算公式：
a． 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
LDL-C含量（mmol/L）= A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管
=5×A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管
C標(biāo)準(zhǔn)管：5mmol/L
b．用96孔板測定的計(jì)算公式如下
LDL-C含量（mmol/L）= A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管
=5×A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管
C標(biāo)準(zhǔn)管：5mmol/L
注意事項(xiàng)：
1. 樣本切勿反復(fù)凍融，最好在取血后12小時內(nèi)完成測定。
2. 配置好的試劑三4℃保存可半個月。
3. 線性范圍為0.17mmol/L- 4.2mmol/L。
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優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司 | 下載次數(shù) |
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