微滴式數(shù)字PCR儀系統(tǒng)是由兩個(gè)儀器(微滴生成儀和)及其相關(guān)的消耗品構(gòu)成。液滴生成儀用于將PCR反應(yīng)生成20,000個(gè)納升大小的液滴。在使用熱循環(huán)儀進(jìn)行PCR后,微滴分析儀將逐個(gè)分析每個(gè)樣品中的液滴。微滴被吸入后,管路將分解乳化的液滴,并使它們依次通過一個(gè)雙色光學(xué)檢測系統(tǒng)。每次運(yùn)行最多可處理 96 個(gè)樣品。系統(tǒng)將計(jì)算陽性和陰性微滴的數(shù)量,從而以數(shù)字格式對(duì)靶DNA進(jìn)行絕對(duì)定量分析。此外,對(duì)于經(jīng)過PCR的液滴,還可以提取擴(kuò)增的產(chǎn)品以用于下游環(huán)節(jié),例如測序或克隆。
微滴式數(shù)字PCR儀的應(yīng)用領(lǐng)域:
1、癌癥生物標(biāo)志研究和拷貝數(shù)變異分析:以較好的靈敏度和解析能力測量癌癥突變的變異程度、檢測稀有的DNA靶拷貝以及解析拷貝數(shù)變異狀態(tài)。
2、病原體檢測:采用極為精確的 系統(tǒng)對(duì)靶DNA或RNA分子中的細(xì)微變化進(jìn)行定量分析,從而檢測和監(jiān)測病原體。
3、新一代測序:無需使用標(biāo)準(zhǔn)曲線,直接對(duì)NGS庫執(zhí)行絕對(duì)定量分析。
4、基因表達(dá)分析:對(duì)少量mRNA和miRNA的細(xì)微變化進(jìn)行可靠和可重復(fù)的檢測。
5、環(huán)境監(jiān)測:使用系統(tǒng)可測試多種環(huán)境樣品,例如土壤和水。
6、食品檢測:采用經(jīng)過驗(yàn)證的ddPCR方法對(duì)轉(zhuǎn)基因生物體 (GMO) 進(jìn)行評(píng)估。
系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn):
1、準(zhǔn)確、靈敏的數(shù)字PCR解決方案,具有廣泛的應(yīng)用;
2、靈活的數(shù)字PCR化學(xué)方法,已針對(duì)TaqMan水解探針和EvaGreen測定進(jìn)行優(yōu)化;
3、靈活的測定設(shè)置,可通過擴(kuò)展實(shí)現(xiàn)高度的靈敏性或較大的通量;
4、簡便而易用的工作流程,通量達(dá)96個(gè)樣品;
5、QX200 Droplet Digital技術(shù)的微滴劃分功能可減少擴(kuò)增效率和PCR抑制劑的影響;
6、便捷的測定設(shè)計(jì),不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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