細(xì)胞運(yùn)動觀察

時間：2023/1/12閱讀：1455

簡介

纖毛與鞭毛是單細(xì)胞或多細(xì)胞生物細(xì)胞表面伸出的特化結(jié)構(gòu)，其內(nèi)部是由微管組成的軸（軸中央由 2 條微管組成，外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞），軸的基部與基體相連，周圍被細(xì)胞膜所包繞。直徑為 0.15～0.3 μm，屬于細(xì)胞的運(yùn)動器官。其運(yùn)動一般認(rèn)為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起，鞭毛運(yùn)動方式為波浪式、纖毛運(yùn)動為波動式。

原理

細(xì)胞運(yùn)動觀察實驗的基本原理是纖毛與鞭毛是單細(xì)胞或多細(xì)胞生物細(xì)胞表面伸出的特化結(jié)構(gòu)，其內(nèi)部是由微管組成的軸（軸中央由 2 條微管組成，外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞），軸的基部與基體相連，周圍被細(xì)胞膜所包繞。直徑為 0.15～0.3 μm，屬于細(xì)胞的運(yùn)動器官。其運(yùn)動一般認(rèn)為是由二聯(lián)微管間的滑動所引起，鞭毛運(yùn)動方式為波浪式、纖毛運(yùn)動為波動式。

暗視野照明法是一種使照射被檢物體的光線不直接進(jìn)入物鏡的照明方法。常用它觀察未染色的活體細(xì)胞或膠體粒子。利用此法，在顯微鏡下觀察時直接看不到通過標(biāo)本的照明光線，而是被檢物反射或衍射的光線進(jìn)入物鏡，可提高分辨率，在暗視野中可以看到明亮的被檢物體的存在和運(yùn)動，但它們的內(nèi)部結(jié)構(gòu)卻看不清楚。

材料與儀器

器材：

探針、蛙板、大頭針、蠟屑、載玻片、蓋玻片、解剖剪、鑷子、牙簽、吸管、平皿、普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、蟾蜍。

試劑：

①蟾蜍生理鹽水。

步驟

基本過程可分為如下幾步：

（一）觀察蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運(yùn)動

A 穿刺法處死蟾蜍取蟾蜍 1 只，左手食指和中指夾住蟾蜍前肢，無名指和小指夾住后肢，大拇指壓住頭部，使頭和軀干呈一定角度?？资殖纸馄梳?，對準(zhǔn)頭和軀干背側(cè)相連的凹陷處（即枕骨大孔），以穿刺法搗毀腦和脊髓。當(dāng)蟾蜍四肢無力下垂時，即表明動物已死。

B 將蟾蜍腹部向上、固定在蛙板上。

C 沿蟾蜍兩側(cè)口角向后剪開約 1 cm，將下頜后翻固定在腹部。

D 在上頜中線距喉頭 1 cm 處放置蠟屑，觀察蠟屑向什么方向移動？記錄蠟屑開始移動到消失的時間。

E 用眼科剪剪取喉頭前部上頜黏膜組織約 4 mm x 4 mm 小塊，用牙簽挑取剪下的黏膜，將縱切面貼到載片上。

F 加 1 滴生理鹽水置載玻片的標(biāo)本上，加蓋玻片，光鏡下觀察。

（二）暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運(yùn)動

A 將前面實驗所用蟾蜍沿腹中線剪開，暴露出黃色圓柱狀精巢。

B 剪取一側(cè)精巢放置盛有自來水的平皿中，用鑷子夾住精巢的一端，清洗血污。

C 取洗凈的精巢放到另一干凈的平皿上，用眼科剪將精巢充分剪碎后，加入數(shù)滴自來水，混勻。

D 用吸管吸取平皿內(nèi)液體，滴 1 滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，稍待 2～3 min，鏡下觀察。

注意事項

1 蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運(yùn)動低倍鏡下觀察纖毛運(yùn)動的現(xiàn)象，然后換高倍鏡仔細(xì)觀察纖毛有規(guī)律的運(yùn)動。

2 暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運(yùn)動低倍鏡下可看到視野中有許多精子，頭部呈長錐形，尾為細(xì)長的線狀結(jié)構(gòu)；高倍鏡下，見有許多靠尾部鞭毛彎曲擺動驅(qū)使運(yùn)動的精子。

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細(xì)胞運(yùn)動觀察

（一）觀察蟾蜍上頜黏膜上皮細(xì)胞的纖毛運(yùn)動

（二）暗視野觀察蟾蜍精子的鞭毛運(yùn)動

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