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        1. 深圳市安培生物科技有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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          血清系列
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          細(xì)胞中液泡系活體染色

          時(shí)間:2023/1/12閱讀:1835
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          簡介

          細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

          原理

          細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本原理是動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復(fù)合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)泡、吞噬泡等。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

          材料與儀器

          器材:
          解剖器材、蠟盤、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學(xué)顯微鏡、蟾蜍。
          試劑:

          ① 1/3000 中性紅;

          ② 0.65% Ringer 液(兩棲動(dòng)物用)(氯化鈉,0.65 g;氯-化-鉀,0.042 g;氯化鈣,0.025 g;蒸餾水,100 ml。)

          步驟

          細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本過程可分為如下幾步:
          A 取蟾蜍 1 只,搗毀脊髓法處死,將其腹面朝上固定于蠟盤上,剪開腹腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載片上。
          B 滴加 1/3000 中性紅,染色 15 min。
          C 濾紙吸去染液。
          D 滴加 0.65% Ringer 液,蓋上蓋片,用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
          E 鏡下觀察。

          注意事項(xiàng)

          1 為便于觀察,在取胸骨劍突時(shí),盡量取較薄部位。

          2 本實(shí)驗(yàn)因是活體染色,在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過程中,應(yīng)注意保持標(biāo)本的活體狀態(tài),特別在取材時(shí)應(yīng)做到準(zhǔn)確、快速。


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