圖1. 摻雜不同濃度鋯（Zr）（0、18、38、58、68、78%）的 ZrNPs 的表征和水降解行為

研究者通過改進(jìn)的高溫共沉淀法，合成了一系列不同鋯（Zr）摻雜濃度的稀土納米粒子。這些納米粒子在水相中表現(xiàn)出優(yōu)異的長(zhǎng)波發(fā)射、高量子產(chǎn)率和可調(diào)的生物降解時(shí)間。

隨著Zr摻雜濃度的增加，納米顆粒的形貌由圓形過渡到方形，尺寸呈現(xiàn)出由大到小的趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，78% ZrNPs的熒光強(qiáng)度比1，2-二氯乙烷（DCE）中的IR-26高出61.3倍，表明其具有較高的近紅外熒光量子產(chǎn)率。此外，通過將 Ho3+和 Tm3+代替Er3+作為鋯基基質(zhì)中的激活劑，進(jìn)一步優(yōu)化了納米顆粒的近紅外發(fā)射性能。動(dòng)態(tài)光散射（DLS）分析顯示，不同Zr摻雜濃度的納米顆粒具有不同的水合粒徑。值得注意的是，當(dāng)Zr含量超過58%時(shí)，納米顆粒開始顯示出降解性。其中，78% ZrNPs的降解性能顯著，在168 h內(nèi)降至初始亮度值的10%以下。

圖2. 68%和78% ZrNPs的體內(nèi)神經(jīng)成像

研究者將68%和78% Zr摻雜的ZrNPs應(yīng)用于神經(jīng)節(jié)內(nèi)神經(jīng)注射，并觀察到所需的NIR-II熒光強(qiáng)度。結(jié)果顯示，78% ZrNPs的熒光強(qiáng)度在24小時(shí)內(nèi)下降至0，而68% ZrNPs的熒光強(qiáng)度仍可檢測(cè)到。此外，研究者還研究了直接給予劑量對(duì)68%或78% ZrNPs降解率的影響。結(jié)果表明，相同劑量的ZrNPs中，Zr摻雜濃度越高，熒光強(qiáng)度下降越快，降解速度更快。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，當(dāng)Zr摻雜濃度較高時(shí)，合成體系主要產(chǎn)生可降解的Zr基納米顆粒而不是不可降解的Y基納米顆粒，導(dǎo)致降解速度更快。同時(shí)，低給藥劑量下ZrNPs表面與水的接觸更多，導(dǎo)致更容易降解?？紤]到足夠的熒光強(qiáng)度和適當(dāng)?shù)慕到鈺r(shí)間窗，用于后續(xù)神經(jīng)成像的78% ZrNPs濃度被確定為300mg/mL。

圖3. 78%的ZrNPs、YNPs和ICG的神經(jīng)成像

這項(xiàng)研究通過直接給予小鼠坐骨神經(jīng)78% ZrNPs、YNPs或ICG，比較了不同時(shí)間點(diǎn)的NIR-II熒光成像。結(jié)果顯示，78% ZrNPs的熒光歸一化強(qiáng)度隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，并在8小時(shí)后達(dá)到初始值的0.02，表明78% ZrNPs幾乎降解并實(shí)現(xiàn)了成像時(shí)間窗。同時(shí)，研究證明了78% ZrNPs在大鼠坐骨神經(jīng)中的降解能力。與ICG（FDA批準(zhǔn)用于臨床的近紅外染料）相比，78% ZrNPs表現(xiàn)出更高的成像質(zhì)量和光穩(wěn)定性。在78% ZrNPs給藥24小時(shí)后，解剖的離體小鼠坐骨神經(jīng)未顯示出NIR-II相機(jī)檢測(cè)到的熒光，而YNPs和ICG在24小時(shí)后仍在神經(jīng)中顯示出顯著的熒光強(qiáng)度。此外，通過蘇木精-伊紅（H&E）染色檢查，觀察到在直接給予ICG或78% ZrNPs 24小時(shí)后，坐骨神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)均一，證明78% ZrNPs具有良好的生物安全性，對(duì)小鼠坐骨神經(jīng)沒有影響。

圖4. 78% ZrNPs 的多重神經(jīng)成像以及神經(jīng)和血管的雙色成像

通過直接給藥并在24小時(shí)內(nèi)觀察，發(fā)現(xiàn)ZrNPs導(dǎo)致神經(jīng)熒光強(qiáng)度逐漸降低且在三次獨(dú)立成像之間沒有相互影響。為了優(yōu)化成像效果并減少背景噪音，科研人員設(shè)計(jì)并合成了白蛋白逃逸染料IR-808Ac，它能避免與白蛋白結(jié)合并加速體外排泄，從而帶來(lái)較低的成像背景信號(hào)。IR-808Ac和78% ZrNPs可分別響應(yīng)808nm和980nm激光激發(fā)，具備無(wú)熒光干擾的雙通道成像特性。合并圖像表明，IR-808Ac在24小時(shí)內(nèi)代謝，允許在沒有信號(hào)干擾的情況下對(duì)血管和神經(jīng)進(jìn)行連續(xù)三次雙通道熒光成像。

該研究在物理神經(jīng)損傷的小鼠模型中，利用78% ZrNPs對(duì)神經(jīng)恢復(fù)過程進(jìn)行了短期和長(zhǎng)期的監(jiān)測(cè)。針對(duì)輕度損傷（10秒鉗夾），在第七天取出受損神經(jīng)進(jìn)行H&E染色，結(jié)果接近正常神經(jīng)，證實(shí)輕度損傷可在7天內(nèi)基本恢復(fù)正常。進(jìn)一步地，研究者模擬了更嚴(yán)重的損傷（30秒或60秒）并同樣施用ZrNPs進(jìn)行長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)。結(jié)果顯示，嚴(yán)重?fù)p傷組的熒光神經(jīng)長(zhǎng)度在7天后開始減小并在第21天達(dá)lowest，表明小鼠未能從此類損傷中恢復(fù)且可能存在惡化跡象。

總結(jié)：通過利用新型可生物降解的納米探針，該研究可以實(shí)現(xiàn)可編程的生物降解時(shí)間。這使研究者能夠更好地了解神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能，為神經(jīng)疾病的早期診斷和治療提供強(qiáng)有力的支持。該納米探針可以幫助臨床醫(yī)生了解神經(jīng)損傷的具體類型，并計(jì)劃適當(dāng)?shù)氖中g(shù)或非手術(shù)干預(yù)，以實(shí)現(xiàn)功能恢復(fù)。

參考文獻(xiàn)

X. Zheng, Y. Du, Z. Dang, K. Lan, G. Liu, J. Ren, X. Wang, S. Zhu, Biodegradable Near-Infrared-IIb Rare-Earth Nanoprobe Enables Time-Programmable Neuroimaging. Adv. Funct. Mater. 2024, 2313278

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