尿素氮（BUN）含量檢測(cè)試劑盒（微量法）

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1243

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

尿素（BUN）是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，BUN構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白質(zhì)氮，血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N，生成的藍(lán)色靛酚和尿素氮的濃度成正比。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：粉劑×2瓶，4℃避光保存，臨用前加2mL蒸餾水充分溶解。

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑三A液：液體20mL×1支，4℃保存；

試劑三B液：液體20mL×1瓶，4℃保存；

將AB溶液保存在冰箱中。使用前將2溶液各20毫升混合，用蒸餾水稀釋至100毫升。

試劑四：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶，4℃保存。10mg尿素。臨用前加入4.66mL蒸餾水配制成1mg/mL尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

操作步驟：

一、樣品處理

1、組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5-10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g，加入1mL蒸餾水），冰上勻漿后于4℃，13000g離心15min，取上清待測(cè)。

2、細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1的比例（建議500萬(wàn)個(gè)細(xì)胞加入1mL蒸餾水），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3s，間隔7s，總時(shí)間3min）；然后4℃，13000g離心15min，取上清置于冰上待測(cè)。

3、血清（漿）或其它液體：直接檢測(cè)。

二、測(cè)定操作：

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)至630nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2、將1mg/mL尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至50μg/mL備用。

3、加樣表：

三、計(jì)算公式：

1、按樣本質(zhì)量計(jì)算：

尿素氮含量（μg/g）= ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷W

=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W。

2.按蛋白濃度計(jì)算：

尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷（Cpr×V提?。?/span>

=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr。

3、按細(xì)胞數(shù)計(jì)算：

尿素氮含量（μg/10⁴ cell）= ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品×V提取÷細(xì)胞數(shù)量

=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷細(xì)胞數(shù)量。

4、按液體體積計(jì)算：

尿素氮含量（μg/mL）=ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×C標(biāo)準(zhǔn)品

=25×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)。

C標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度，25μg/mL；V提?。禾崛∫后w積，1mL；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣品蛋白濃度，mg/mL；細(xì)胞數(shù)量：以萬(wàn)計(jì)。

注意事項(xiàng)：

1、配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周。

2、ΔA測(cè)定大于1或者A測(cè)定管大于1時(shí)，建議將樣品用蒸餾水稀釋后在進(jìn)行測(cè)定。