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        1. 上海尚寶生物科技有限公司
          初級(jí)會(huì)員 | 第4年

          400-611-0007

          當(dāng)前位置:上海尚寶生物科技有限公司>>試劑盒>>蛋白定量試劑盒>> 改良Lowry法蛋白定量試劑盒

          改良Lowry法蛋白定量試劑盒

          參  考  價(jià):170 - 260
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號(hào)

          • 品牌

            其他品牌

          • 廠商性質(zhì)

            生產(chǎn)商

          • 所在地

            上海市

          規(guī)格

          500T 170元 999盒可售

          1000T 260元 999盒可售

          更新時(shí)間:2021-07-16 16:11:55瀏覽次數(shù):444次

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500T/1000T
          貨號(hào) 15269 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研使用
          尚寶生物改良Lowry法蛋白定量試劑盒是利用蛋白中肽鍵與銅離子結(jié)合成四配位基銅離子復(fù)合物,后者與Folin試劑(福林酚)反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色比色物,用分光光度法(酶標(biāo)儀或分光光度計(jì))檢測(cè)750nm處吸光度,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,求得待測(cè)蛋白樣品的濃度,在1~1500μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

          改良Lowry法蛋白定量試劑盒

          產(chǎn)品貨號(hào):T15269

           

          產(chǎn)品規(guī)格:500T/10000T

           

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

          目前常用的蛋白濃度檢測(cè)方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。

          尚寶生物改良Lowry法蛋白定量試劑盒是利用蛋白中肽鍵與銅離子結(jié)合成四配位基銅離子復(fù)合物,后者與Folin試劑(福林酚)反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色比色物,用分光光度法(酶標(biāo)儀或分光光度計(jì))檢測(cè)750nm處吸光度,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,求得待測(cè)蛋白樣品的濃度,在11500μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

           

          產(chǎn)品組成:

          產(chǎn)品名稱(chēng)

          500T

          1000T

          保存條件

          試劑(A): Folin-Ciocalteu Reagent

          5ml

          10ml

          室溫,避光

          試劑(B): 改良 Lowry Reagent

          B1: Lowry A

          100ml

          2×100ml

          室溫

          B2: Lowry B

          2ml

          4ml

          室溫

          B3: Lowry C

          2ml

          4ml

          室溫

          臨用前,按 Lowry A:B:C=50:1:1比例配制改良Lowry Reagent,即配即用。

          試劑(C): 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)

          20mg

          20mg

          室溫

          試劑(D): 蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液

          1.5ml

          1.5ml

          室溫

          試劑(E): ddH2O

          5ml

          10ml

          室溫

           

          自備材料:

          1. 酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)

          2. 96孔板或離心管

           

          操作步驟(僅供參考)

          1. 1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)(20mg)充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。

          2. 取適量20mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn),稀釋至終濃度為1500μg/ml或所需濃度。如取75μl 20mg/ml 蛋白標(biāo)準(zhǔn),加入925μl稀釋液,充分混勻,即配制1500μg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)。

          特別提示:待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測(cè)蛋白溶解于蔗糖中,亦取20mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaClPBS作為溶解BSA稀釋液。稀釋后的1500μg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)-20℃長(zhǎng)期保存。

          3. 根據(jù)樣品數(shù)量,按Folin-Ciocalteu Reagent:ddH 2 O =11的比例配制 Folin-Ciocalteu工作液,充分混勻。

          4. 根據(jù)樣品數(shù)量,按試劑(B1):試劑(B2):試劑(B3)=50:1:1 的比例配制改良Lowry Reagent工作液,充分混勻。例如取 10ml Lowry A0.2ml Lowry B、0.2ml Lowry C,配制成10.4ml改良Lowry Reagent工作液。

          5. 1500μg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)用稀釋待測(cè)樣品的溶液5倍梯度稀釋?zhuān)瑵舛确謩e為 300μg/ml、60μg/ml12μg/ml、2.4μg/ml、0μg/ml,各取40μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔。

          6. 40μl待測(cè)蛋白樣品或稀釋液(空白對(duì)照)96孔板的樣品孔中,如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測(cè)蛋白樣本的溶液不同,應(yīng)在待測(cè)蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液;如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測(cè)蛋白樣本的溶液相同,無(wú)需在待測(cè)蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液。

          7. 用多通道微量移液器快速將200μl配置好的改良Lowry Reagent工作液加入至各孔,立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動(dòng)輕輕混勻30s。室溫準(zhǔn)確孵育10min

          8. 用多通道微量移液器快速將20μl新鮮配置的Folin-Ciocalteu工作液加至上述各孔中,立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動(dòng)輕輕混勻30s。加蓋以防止液體揮發(fā),室溫準(zhǔn)確孵育30min

          9. 輕輕混勻96孔板,酶標(biāo)儀或微量滴定板讀數(shù)儀測(cè)定750nm處吸光度,也可用分光光度計(jì)測(cè)定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積,檢測(cè)樣品數(shù)量亦相應(yīng)減少。對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得相應(yīng)待測(cè)樣品的蛋白濃度。同時(shí)建議所以樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品)采用三復(fù)孔,求平均值。

           

          注意事項(xiàng):

          1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)粉末溶解于蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后,即獲得蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測(cè),該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長(zhǎng)期保存。

          2. 待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測(cè)蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測(cè)定不準(zhǔn)確。

          3. 如果沒(méi)有酶標(biāo)儀,也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積。應(yīng)按比例適當(dāng)加大改良Lowry Reagent工作液的用量使總體積不小于最小檢測(cè)體積,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量亦相應(yīng)按比例放大。使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí),每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。

          4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

           

          有效期6個(gè)月有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。

           


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