超高靈敏型CCK-8細(xì)胞活力測定試劑盒

超高靈敏型CCK-8細(xì)胞活力測定試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性相對定量及定量檢測的 快速、高靈敏度試劑盒，比傳統(tǒng)的 MTT、XTT 及 CCK-8 方法具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

超高靈敏型CCK-8細(xì)胞活力試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的超高靈敏型 CCK-8 溶液，無須再進(jìn)行任何配制等操作。 無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊 96 孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外 的步驟去溶解反應(yīng)生成物，可用于大批量樣品的高通量檢測。

使用方法：

1. 使用 96 孔板，細(xì)胞培養(yǎng)和處理完畢。

2. 逐孔加入超高靈敏型 CCK-8 試劑，每孔 100μl 培養(yǎng)基中加入 10μl 超高靈敏型 CCK-8 試劑。

3. 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育 1~4 小時。

4. 于 490nm 處測定 OD 值。

5. 結(jié)果分析 將各測試孔的 OD 值減去對照孔 OD 值。各平行孔的 OD 值取平均數(shù)。 細(xì)胞活力% =（加藥細(xì)胞 OD-空白 OD）/（對照細(xì)胞 OD-空白 OD）×*

6. 若使用除 96 孔外的培養(yǎng)板，試劑用量按照培養(yǎng)基體積等比例增減。

使用注意事項(xiàng)：

1. 試劑加入后需輕輕振搖培養(yǎng)板，使超高靈敏型CCK-8試劑盒與培養(yǎng)基充分混勻。

2. 試劑加入后培養(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異。對于貼壁細(xì)胞，加入超高靈敏型 CCK-8 的培養(yǎng)時間一般為 1~4 小時，但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細(xì)胞種類而定）。 與貼壁細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞較難顯色。對于懸浮細(xì)胞，在加入超高靈敏型 CCK-8 培養(yǎng) 1~4 小時后，可先從 培養(yǎng)箱中取出，目測染色程度或用酶標(biāo)儀測定。若顯色困難，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時后 再確定。

3. 如果實(shí)驗(yàn)中有還原劑，需要檢查背景的 OD 值，即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物，然后加入超高靈敏型 CCK-8 試劑在一定時間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較（只加超高靈敏型 CCK-8 試劑），如果 OD 值明顯偏高，則說明有反應(yīng)。

4. 若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)生變化，建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入超高靈敏型CCK-8試劑。 含有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用。

5. 如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液，建議設(shè)定 600nm（或 600nm 以上）作為參比波長，扣除參比波長的 OD 值即可。

6. 如果要測定細(xì)胞的具體數(shù)量，需要先做一個標(biāo)準(zhǔn)曲線。

7. 若測得 OD 值過高，可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或超高靈敏型 CCK-8 試劑用量。

8. 本試劑盒靈敏度高，相比傳統(tǒng)的 CCK-8 法及 MTT、XTT 法，建議起始細(xì)胞加樣數(shù)/培養(yǎng)數(shù)減半或更少，其 他實(shí)驗(yàn)條件不變。如用 CCK-8 法時需加 4000 個細(xì)胞培養(yǎng)后檢測，用本試劑盒時僅需 2000 個細(xì)胞即可。

9. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，于 490nm 所測得 OD 值在 0.5-1.5 范圍內(nèi)為佳。

試劑包裝：

100 次：1ml×1 瓶；

500 次：5ml×1 瓶；

3,000 次：5ml×6 瓶；

10,000 次：100ml×1 瓶；

貯藏條件：

      超高靈敏型 CCK-8 在避光 0~5℃的條件下存放一年，測定效果*不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。

本產(chǎn)品僅供科研使用，不做其它用途。