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          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞

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          更新時(shí)間:2024-11-05 12:07:40瀏覽次數(shù):2819

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
          貨號 YS-01X8326 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:28S核糖體蛋白S33抗體 FAM81A蛋白抗體 NCI-H2052人間皮瘤細(xì)胞 背板膠質(zhì)乙酰酯酶抗體 Hs 414.T人纖維肉瘤細(xì)胞 原鈣粘蛋白γA6抗體 SBC-5人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞

          詳細(xì)介紹

          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞

          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號

          腸動脈

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          成纖維細(xì)胞樣

          YS-01X8326

          細(xì)胞簡介:

          兔腸動脈平滑肌分離自腸系膜動脈組織;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側(cè),后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。腸動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

          方法簡介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測:

          實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率:每2-3天換液一次

          生長特性:貼壁

          細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性:可傳3代左右

          消化液:0.25%

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

          兔腸動脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

           ?、?消化培養(yǎng)法

            ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

            ④器官培養(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          總(T-GSH/氧化型(GSSG)測定試劑盒(微板法)

          酸性0酸酶(ACP)測定試劑盒(微板法)

          紅細(xì)胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測定試劑盒(比色法)

          銅-ATP酶(Cu-ATPase)測定試劑盒(比色法)

          豬載脂蛋白B(Apo-B)試劑盒

          Human sarcomeric - actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )試劑盒

          Rabbitsolubleclusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒 進(jìn)口分裝

          CLIAKitforApoA1(Humanai-apolipoproteinA1aibody)ELISAKit人抗載脂蛋白抗體A1

          血清/血漿總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量試劑盒20

          PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit豬腸三葉因子(ITF)試劑盒

          RPUSD1蛋白抗體

          細(xì)胞膜蛋白Derlin抗體

          KLRB1F重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白  Protein

          RNA結(jié)合基元蛋白24(RBM24)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)

          GIF重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

          BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

          SELP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

          MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)

          BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

          IL1B重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein

          HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)

          WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

          兔腸動脈平滑肌細(xì)胞大鼠β防御素2(DEFB2)試劑盒 ,英文名: DEFB2 ELISA Kit

          Rabbit immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白G(IgG)試劑盒

          ELISA 小鼠骨保護(hù)素(mouse OPG)  進(jìn)口分裝

          CLIAKitforIL-11ELISAKit大鼠白介素11

          通用型馬原蟲性腦脊髓(EquineProtozoaMyeloencephalitis)試劑盒20

          ELISAKitVEGFR-1大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

            4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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