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EVOM2跨膜細胞電阻儀是二代的用于特異性完成組織培養(yǎng)研究中TEER測量的電阻儀,與一代的EVOM相比具有操作更簡單,使用更輕松的特點。EVOM2不僅可以定性地測量單層貼壁細胞的健康狀態(tài),而且也能定量地測量單層細胞的融合情況。
EVOM2 電路設(shè)計和STX2電極的結(jié)合,讓其可以監(jiān)測單層細胞的融合狀態(tài),當(dāng)與WPI 公司設(shè)計的單個小室結(jié)合使用時,它也可以用來完成更加精確的定量測量或更低電阻的測量,如血腦屏障(BBB)內(nèi)皮生長電阻測量。
工作原理
EVOM2 跨膜細胞電阻儀的工作原理是通過主機產(chǎn)生一個10 μA的恒定跨膜電流,同時以一定的頻率反轉(zhuǎn)電極的極性,這樣電極膜都沒有電荷累積,通過STX2 的兩個電流電極(I1和I2)使10 μA 的電流跨過細胞膜,另一對電極(V1和V2)測量要求達到10 μA電流所需要的電壓,并將信息發(fā)送給處理器。處理器根據(jù)歐姆定律將其轉(zhuǎn)化為歐姆,在讀數(shù)表上顯示數(shù)字。因為電流是固定的10 μA,因此,很容易就轉(zhuǎn)化出測量結(jié)果。如在膜電阻為1000 Ω時,10 μA電流通過的電壓應(yīng)該是10mV;在200 Ω膜電阻時,10 μA的電流將產(chǎn)生2 mV的電壓;不論何種情況,在膜或電極上所消耗的能量都非常小。
儀器用途
■ 用于研究血腦屏障內(nèi)皮細胞的藥物和營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運;
■ 用于CaCo-2大腸癌細胞或其它粘膜或上皮癌細胞的藥效學(xué)研究;
■ 用于培養(yǎng)的腸道粘膜細胞的藥物吸收和營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運研究;
細胞電阻儀測量常見問題的解決方案:
1、在每次測電阻之前是否需要每次都對電極等進行檢測?
答:每次測量前對儀器自檢即可,電極不需要每次都自檢,因為電極通常出問題的概率比較小,除非感覺測量結(jié)果異常,并且儀器自檢也正常時,才考慮電極的問題。
2、我在測跨細胞電阻時,使用的是24孔板transwell小室,測得時候外側(cè)電極片會碰到接觸小室外側(cè),這樣時候會影響結(jié)果?
答:外側(cè)電極片用于向溶液中注入電流,只要電極片能接觸到溶液就不會影響測量。
無論內(nèi)側(cè)還是外側(cè)電極片,碰到小室都問題不大,只要電極片浸入到溶液中即可,溶液充當(dāng)電極與細胞之間的導(dǎo)體。
3、在測電阻時,有時小室內(nèi)側(cè)培養(yǎng)基液面不足以沒過電極片,這時再往里加培養(yǎng)基,是否會影響結(jié)果?
答:測量時添加的培養(yǎng)液盡量能使電極片浸沒。如果因某種實驗考慮而無法做到這一點,則應(yīng)當(dāng)確保在測量空白和細胞時,添加的溶液體積保持一致(上面及下面),這樣,沒有細胞時的空白電阻才能代表有細胞時的空白值。
4、上次我測空白電阻(未加細胞之后培養(yǎng)基)為200Ω左右,加入細胞12小時后測量,電阻值反而低了,是什么原因?
答:加細胞后的電阻不會比不加細胞更低,如果低的話也只是誤差范圍內(nèi)的差距,或者是由于電極浸入液面深度不同造成的差距。當(dāng)細胞沒有融合而處于分散狀態(tài)時,電阻基本上和空白一個水平。你可以再次測量留意一下。
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