詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人輕鏈鐵蛋白英文名稱:Human L-ferritin ELISA Kit產(chǎn)品別名:人L-ferritin elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human L-ferritin ELISA Kit |
貨號 | CS-E4080 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
甘油(glycerol)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒Tie1(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1) ELISA kit 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶1
卵脂脂酰膽(phosphatidylcholine;PC)比色法定量檢測試盒ANG-2(Human Angiopoietin 2) ELISA Kit 人血管生成素2
鞘脂(sphingomyelin)比色法定量檢測試盒ANG-1(Human Angiopoietin 1) ELISA Kit 人血管生成素1
細胞二脂酰甘油(DAG)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒ANG(Human Angiogenin) ELISA Kit 人血管生長素
組織二脂酰甘油(DAG)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒ANG- II (Human angiotension II ) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ
細胞三酸肌醇(IP3)含量化學比色法定量檢測試盒Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit 人帕金森氏病2Parkin
組織三酸肌醇(IP3)含量化學比色法定量檢測試盒VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白
細胞三酸肌醇(IP3)含量化學熒光定量檢測試盒Ntn4(Human Netrin-4) ELISA Kit 人軸突生長誘向因子4
組織三酸肌醇(IP3)含量化學熒光定量檢測試盒Ntn1(Human Netrin-1) ELISA Kit 人軸突生長誘向因子1
人輕鏈鐵蛋白ELISA試劑盒細胞三酸肌醇(IP3)含量FR定量檢測試盒REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IV
組織三酸肌醇(IP3)含量FR定量檢測試盒VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖
細胞鈣離子濃度比色法定量檢測試盒Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit 人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε
組織鈣離子濃度比色法定量檢測試盒ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4
體液鈣離子濃度比色法定量檢測試盒Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因
食物鈣離子濃度比色法定量檢測試盒PAQR7(Human progestin and adipoQ receptor family member VII ) ELISA Kit 人孕和adipoQ受體家族成員ⅦCanine NT-proANP(N-Terminal proAtrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
Canine NT-proANP(N-Terminal proAtrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit英文名稱:ADM 1-52/AM 1-52/Adrenomedullin 1-52質(zhì)金屬蛋白酶-26體
高化學,合成試, 4-羥庚
SIP1 peptide英文名稱:ILK-1 (Integrin-linked protein kinase 1)干擾素α抗體
英文名稱:Amyloid protein precursor絲裂原活化蛋白激酶激酶4體
高化學,固相合成, 5--2,4-二
SIRT1(sirtuin 1)英文名稱:Aromatase化肌醇聚鹽酶樣蛋白1抗體
英文名稱:ACTH(1-39)MYOZ體
高化學,合成試, 1-糠咯
Skp2 peptide英文名稱:SP-C peptide化肌醇聚鹽酶樣蛋白1抗體