詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
人鞘脂激活蛋白原英文名稱:PSAP Elisa kit產(chǎn)品別名:人PSAP elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱:人鞘脂激活蛋白原ELISA試劑盒
英文名稱: PSAP Elisa kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
標(biāo)本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過程需在冰上進(jìn)行(有條件實驗室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標(biāo)本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國家承認(rèn)的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
公司采用全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
以下是人鞘脂激活蛋白原ELISA試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
細(xì)胞短鏈羥脂酰輔酶A脫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試盒C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε
細(xì)胞中鏈羥脂酰輔酶A脫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試盒C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ
細(xì)胞長鏈羥脂酰輔酶A脫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試盒C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α
組織短鏈羥脂酰輔酶A脫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試盒2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit 人2,3-二酸甘油酸
組織中鏈羥脂酰輔酶A脫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試盒LUM(Human lumican) ELISA Kit 人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白
組織長鏈羥脂酰輔酶A脫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試盒NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit 人Na+/H+交換體3
細(xì)胞短鏈脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測試盒OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 人孤腓肽
人鞘脂激活蛋白原ELISA試劑盒細(xì)胞中鏈脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測試盒ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解素
細(xì)胞長鏈脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測試盒ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解素
組織短鏈脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測試盒ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解素
組織中鏈脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測試盒LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit 人脂氧素A4
組織長鏈脂酰輔酶A硫解酶(KETOACYL COA THIOLASE)活性比色法定量檢測試盒PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體
細(xì)胞短鏈脂酰輔酶A氧化酶(acyl-CoA oxidase)活性比色法定量檢測試盒Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素
細(xì)胞中鏈脂酰輔酶A氧化酶(acyl-CoA oxidase)活性比色法定量檢測試盒LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit 人脂壁酸
細(xì)胞長鏈脂酰輔酶A氧化酶(acyl-CoA oxidase)活性比色法定量檢測試盒AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人胺呋Canine SNCa(Synuclein, Alpha) ELISA Kit
Canine SNCa(Synuclein, Alpha) ELISA Kit英文名稱:AVSD2黑皮質(zhì)3受體體
高化學(xué),合成試, 四喃
phospho-CK II beta (Ser209)英文名稱:ATXN7L3B人酰膽受體抗體(AChRab)免疫試盒
英文名稱:CKAP2Menin抑癌蛋白體
高化學(xué),固相合成, 4-正戊氧 98%50TFGF-18
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22)英文名稱:VAMP1G蛋白/鳥苷結(jié)合蛋白抗體
英文名稱:CHMP4B+CHMP4C錯配修復(fù)蛋白3體
96%100TSIP
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22)英文名稱:VAMP2GDNF家族受體α4抗體 GDNFRα4