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產(chǎn)品簡介
痤瘡丙酸桿菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
詳細(xì)介紹
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，產(chǎn)品僅用于科研在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Propionibacterium acnes |
貨號(hào) | CP934623 |
痤瘡丙酸桿菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。產(chǎn)品僅用于科研
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DN段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6，5，4，3，2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR（見下步），每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：
應(yīng)用案例：
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。產(chǎn)品僅用于科研
稀釋陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DN段作為陽性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 4 號(hào)管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20 μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9.在 PCR 管中加入下列成分。產(chǎn)品僅用于科研
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
TRIM3/RNF22 環(huán)指蛋白22抗體人極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試盒
TRIM29/ATDC 共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥D相關(guān)蛋白抗體人激肽釋放酶8(KLK 8)ELISA試盒
TRIM25 雌激素反應(yīng)鋅指蛋白抗體人激肽釋放酶7(KLK 7)ELISA試盒
TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體人激肽釋放酶6(KLK 6)ELISA試盒
TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體人激肽釋放酶2(hK 2)ELISA試盒
TRIM11/RNF92 環(huán)指蛋白92抗體人激肽釋放酶11(KLK 11)ELISA試盒
TRIM10/RNF9 環(huán)指蛋白9抗體人激肽釋放酶10(KLK 10)ELISA試盒
痤瘡丙酸桿菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒TRIB3/p65 interacting inhibitor of NF-kappaB 神經(jīng)細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白激酶抗體人激肽釋放酶1(KLK 1)ELISA試盒
TRIB2 MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試盒
TRIAD3 鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA試盒
TRH 促狀腺素釋放激素抗體人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)ELISA試盒
TRF2 端粒結(jié)合蛋白2抗體人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF1A)ELISA試盒
TReP132/RAPA 乳腺癌抗雌激素抵抗蛋白2抗體人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)ELISA試盒
TREML2/TLT2 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試盒
TREML1/TLT1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試盒C10-C40偶數(shù)碳正構(gòu)烴混標(biāo)50mg/L于庚，1ml
ButhidazoleButhidazole[55511-98-3]1ml
B-L肉湯-干粉培養(yǎng)基B-L肉湯-干粉培養(yǎng)基,試，無證書 ,250g
B-L瓊脂培養(yǎng)基B-L瓊脂培養(yǎng)基,試，無證書 ,250g
Bisoprolol fumarateBisoprolol fumarate[104344-23-2]10ml
Beta-apo-土霉素（藥典標(biāo)準(zhǔn)品）Beta-apo-oxytetracycline[18751-99-0]20mg
B32脫精氨酸（mono-Arg）甘精胰島素5mg/支，供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
B32脫精氨酸（mono-Arg）甘精胰島素5mg/支，供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
AOZ-D43-Aminooxazolidin-2-one-d410mg
AOZ(呋喃唑酮代謝產(chǎn)物)AMOZ[43056-63-9]50mg