詳細(xì)介紹
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人細(xì)胞纖維連接蛋白英文名稱:cFn ELISA kit產(chǎn)品別名:人cFn elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | cFn ELISA kit |
貨號 | CS-E3874 |
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Mink Ig 貂IgG (親和純化)
冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Rabbit IgG 兔IgG(親和層析純化)
石蠟切片組織IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Rabbit IgM (親和純化) 兔IgM
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Rat IgG (親和純化) 大鼠IgG
冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Rat IgM (親和純化) 大鼠IgM
石蠟切片組織IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒 特級胎牛血清
人細(xì)胞纖維連接蛋白ELISA試劑盒細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)比色法定量檢測試盒 優(yōu)級胎牛血清
細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光定量檢測試盒 標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清
IP3R受體蛋白表達(dá)西方雜交分析試盒 新生牛血清
IP3R受體蛋白免疫共沉淀分析試盒 特級馬血清
IP3R受體蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試盒Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源)
細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試盒Anthrax Paper antigen 健康皮張?zhí)烤铱乖?/span>
載玻片細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Goat Anti-Bovine IgG Whole serum 羊抗牛IgG抗血清
冰凍切片組織DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Goat Anti-Mouse IgG Whole serum 羊抗小鼠IgG抗血清
石蠟切片組織DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Goat Anti-Mouse IgM Whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清Rhodamine (TRITC)–conjugated Goat Anti-Human IgG (H+L)
Rhodamine (TRITC)–conjugated Goat Anti-Human IgG (H+L)C19orf51英文名稱:APG7人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)免疫試盒
英文名稱:Parvalbumin致盲因LCA5蛋白體
Wnt16英文名稱:phospho-SNAI2 (Ser155+Ser158+Ser160+Tyr163+Tyr168)化脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體
C19orf52英文名稱:ANTXR2人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)免疫試盒
ZNF532英文名稱:TRIM35化叉蛋白3A體
WDR23英文名稱:phospho-SLC29A4 (Tyr198)果糖胺-3激酶抗體
C19orf55英文名稱:ATG4C人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)免疫試盒
ZNF516英文名稱:TMEM16C化叉蛋白家族1體
TCAB1英文名稱:SYT6精結(jié)合蛋白3抗體
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行。