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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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—— 銷售熱線 ——
13585831301 |
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1英文名稱：ATF-1 ELISA Kit產(chǎn)品別名：人ATF-1 elisa試劑盒用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | ATF-1 ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E3664 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
佛羅里達(dá)側(cè)耳、蠔菇Anti-Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、馬、豬有絲分裂激酶A抗體IgG
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1ELISA試劑盒佛羅里達(dá)無孢子側(cè)耳Anti-Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠酸化有絲分裂激酶A抗體IgG
扇形平菇、扁形平菇Anti-Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記極光激酶B抗體IgG
真線側(cè)耳Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠酸化有絲分裂激酶B/C抗體IgG
真線側(cè)耳短孢變種Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、C抗體IgG
擬囊體側(cè)耳、(鮑魚菇)Anti-Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、豬有絲分裂激酶B抗體IgG
裂皮側(cè)耳Anti-AVEN/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制抗體IgG
白黃側(cè)耳、紫孢平菇、姬菇Anti-AVPR2/FITC 熒光素標(biāo)記精酸加壓素受體2抗體IgG
金頂側(cè)耳、榆黃磨、金頂磨Anti-Axin1/FITC 熒光素標(biāo)記軸蛋白1Axin protein 1抗體IgG
尖鱗黃傘Anti-B7-DC/PDL2/CD273 /FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡配體2抗體IgG
滑菇、光帽黃傘Anti-B7-H1/PDL1/CD274 /FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡配體1抗體IgG
絡(luò)小皮傘菌、鬼毛針、黑柄皮傘菌Anti-B7-H4/FITC 熒光素標(biāo)記B7H4抗體IgG
玉蕈、真姬菇Anti-BACE/ASP2 /FITC 熒光素標(biāo)記β分泌酶抗體IgG
潔麗香菇 豹皮菇Anti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體IgG
粗毛斗菇Anti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體IgG 化聚烯(CPVC)人核糖核酸酶elisa試盒
化聚烯人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白elisa試盒
三烯人核基質(zhì)蛋白22elisa試盒
雙環(huán)戊二烯(內(nèi)型和外型異構(gòu)體混合物）人過氧化脂質(zhì)elisa試盒
四烯人胱抑素Celisa試盒
3-烯人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶elisa試盒
異戊烯人病elisa試盒
2,4-二苯酚人骨粘連蛋白elisa試盒
2,6-二酚人骨形成蛋白6elisa試盒
3,4-二苯酚人胱天蛋白酶12elisa試盒
間基苯酚人胱天蛋白酶3elisa試盒
對苯二酚人胱天蛋白酶9elisa試盒
對酚人骨形成蛋白4elisa試盒
對酚人骨形成蛋白2elisa試盒
間酚人骨涎蛋白elisa試盒
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