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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人腫瘤壞死因子誘導(dǎo)基因6蛋白英文名稱：Human TNFAIP6 ELISA Kit產(chǎn)品別名：人TNFAIP6 elisa試劑盒用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human TNFAIP6 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3671 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項：
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時，請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
土曲霉Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Thr735) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體IgG
醬油曲霉Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體IgG
寄生曲霉Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠酸化組蛋白去?；?抗體IgG
米曲霉Anti-CAD/CPAN/FITC 熒光素標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體IgG
嗜熱鏈霉菌Anti-CA I/FITC 熒光素標(biāo)記碳酸酐酶1抗體IgG
華美鏈霉菌Anti-CA II /FITC 熒光素標(biāo)記碳酸酐酶2抗體IgG
人腫瘤壞死因子誘導(dǎo)基因6蛋白ELISA試劑盒玫瑰色鏈霉菌Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位抗體IgG
龜裂鏈霉菌Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標(biāo)記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白抗體IgG
黑化鏈霉菌Anti-p-Caldesmon/FITC 熒光素標(biāo)記酸化鈣介質(zhì)素抗體IgG
細(xì)黃鏈霉菌Anti-Smoothened/SMOH /FITC 熒光素標(biāo)記跨膜蛋白Smoothened抗體IgG
藤黃色鏈霉菌Anti-Calpain 1/FITC 熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶抗體IgG
黃色長孢鏈霉菌Anti-Calpain 2/FITC 熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶2抗體IgG
吸水鏈霉菌Anti-Calponin 1/FITC 熒光素標(biāo)記鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體IgG
吸水鏈霉菌Anti-Camk1g/FITC 熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)蛋白依蛋白激酶IG抗體 IgG
灰色鏈霉菌Anti-CaMK2a/FITC 熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)素依蛋白激酶2α抗體IgG 蒿本內(nèi)酯人踝蛋白elisa試盒
基蓮心人花生四烯酸elisa試盒
異蓮心人花生四烯酸5脂加氧酶elisa試盒
蓮心人紅細(xì)胞生成素受體elisa試盒
莫諾苷人紅細(xì)胞生成素elisa試盒
漢黃芩苷人紅細(xì)胞膜蛋白elisa試盒
木蘭花人紅細(xì)胞刺激因子elisa試盒
紅花色素 A人橫紋肌輔肌動蛋白αelisa試盒
蕓香柚皮苷人黑素瘤衍生亮酸拉鏈額外核因子elisa試盒
異水飛薊賓人黑色素細(xì)胞抗體elisa試盒
水飛薊汀人黑色素細(xì)胞刺激素elisa試盒
二丹參人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子elisa試盒
丹參I 人黑色素瘤標(biāo)記物elisa試盒
原人參三醇人肝癌抗原elisa試盒
原人參二醇人甘油三酯elisa試盒
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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