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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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13585831301 |
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人腫瘤壞死因子γ英文名稱：TNFγ ELISA Kit產(chǎn)品別名：人TNFγ elisa試劑盒用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | TNFγ ELISA Kit |
貨號 | CS-E3675 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依性鈣通道Cav3.1抗體IgG
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)Anti-CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標(biāo)記成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)Anti-CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgG
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG
北京棒桿菌Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG
谷酸棒狀桿菌Anti-CBP/FITC 熒光素標(biāo)記CREB結(jié)合蛋白抗體IgG
黃色短桿菌Anti-CBX3/FITC 熒光素標(biāo)記染色盒同源物3抗體IgG
黃色短桿菌Anti-CBX5/FITC 熒光素標(biāo)記CBX5抗體IgG
產(chǎn)短桿菌Anti-Cbx8/FITC 熒光素標(biāo)記染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體IgG
產(chǎn)短桿菌Anti-CC16/FITC 熒光素標(biāo)記克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗體IgG
人腫瘤壞死因子γELISA試劑盒豇豆慢生根瘤菌Anti-CCK8/FITC 熒光素標(biāo)記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽)
巨大芽孢桿菌Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗體IgG
膠質(zhì)芽孢桿菌Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體IgG
巨大芽孢桿菌Anti-CCL4/MIP-1 Beta/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體IgG
地衣形芽孢桿菌Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgG 肟草人肌抑素elisa試盒
嘧硫草醚人肌養(yǎng)蛋白elisa試盒
殺螟丹人肌細(xì)胞生成素elisa試盒
滅菌丹人肌酸激酶同工酶MBelisa試盒
克菌丹人肌酸激酶elisa試盒
氧氟草醚人骨保護(hù)素elisa試盒
粉唑醇人谷胱甘肽-過氧化物酶elisa試盒
嘧磺隆人谷胱甘肽過氧化酶elisa試盒
芐嘧磺隆人谷酸脫羧酶自身抗體elisa試盒
高效氟氰菊酯人谷胱甘肽elisa試盒
醚苯磺隆人谷酸脫羧酶elisa試盒
酯人谷酸脫酶elisa試盒
氰菊酯人孤腓肽elisa試盒
氰菊酯人鉤端螺旋體IgMelisa試盒
福美司坦人鉤端螺旋體IgGelisa試盒
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