化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
牛眼莫拉氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細(xì)介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Moraxella bovoculi |
貨號 | CP934451 |
產(chǎn)品特征:
牛眼莫拉氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是牛眼莫拉氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
對稱三苯植物組織微粒體分離試盒
對碘氟苯植物組織膜性囊泡（vacuole）分離試盒
對二氨基聯(lián)苯植物組織質(zhì)膜（plasma membrane）分離試盒
對二氟苯植物花粉原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對二氧基苯植物根瘤原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對二硝基苯擬南芥葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對二烯苯玉米葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對氟碘苯水稻葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對氟三氟苯大麥葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對氧基碘苯煙草葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試盒
對碘苯植物質(zhì)粒菌化試盒
對間硝基苯純化葉綠體DNA萃取試盒
對苯植物組織葉綠體DNA萃取試盒
對羥基聯(lián)苯高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試盒
對巰基苯高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高純分離試盒pCW-Cas9pCW-Cas9低溫運輸，-20℃保存2 ug
pCSN44pCSN44低溫運輸，-20℃保存2 ug
pCSA110pCSA110低溫運輸，-20℃保存2 ug
牛眼莫拉氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
過敏原特異性抗體聯(lián)檢試劑盒（微陣列芯片法） 黃曲霉毒1單克隆抗體
風(fēng)濕病自身抗體聯(lián)檢試劑盒（微陣列芯片法） 氯霉素單克隆抗體
抗核抗體譜聯(lián)檢試劑盒（微陣列芯片法） 磺胺類抗體
腸道病毒二聯(lián)芯片（微陣列芯片法） 孔雀石綠單克隆抗體
腸道病毒三聯(lián)芯片（微陣列芯片法） 四環(huán)素(TC)單克隆抗體
傷寒副傷寒分型聯(lián)檢蛋白芯片試劑盒（微陣列芯片法） 氟喹諾酮類抗體
副傷寒甲乙丙抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 呋喃西林單克隆抗體
傷寒 （ST）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 蘇丹單克隆抗體
登革熱（Dengue ）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 林可霉素單克隆抗體
水痘帶狀皰疹病毒（VZV）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 氯霉素酶聯(lián)免疫試劑盒
流行性出血熱（EHF）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 克倫特羅ELISA試劑盒
輪狀病毒（HRV）快速檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 恩諾沙星ELISA試劑盒
結(jié)核桿菌（TB）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 呋喃它酮ELISA試劑盒
幽門螺桿菌（HP）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 呋喃妥因ELISA試劑盒
肺炎衣原體(CP)抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 呋喃西林ELISA試劑盒
人血清總IgE測定檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 呋喃唑酮ELISA試劑盒
自由組合過敏原（八項）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 黃曲霉毒B1 ELISA試劑盒
過敏原八項抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 萊克多巴胺ELISA試劑盒
類風(fēng)濕因子(RF)抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 氯丙嗪ELISA試劑盒