天辰回收 島津/安捷倫1260液相色譜儀
高效液相色譜法(HPLC)具有高壓、高效、高速、高靈敏度、高選擇性等特點,廣泛應用于醫(yī)藥、環(huán)保、石化、食品、化工等行業(yè),是現在分離分析的重要方法,本文著重介紹HPLC的工作原理、基本組成及高效液相色譜名詞術語,使新學者快速了解高效液相色譜知識,在日常操作中理論與實踐結合,確保HPLC的高效運行、快速分析。
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HPLC工作原理
100多年前植物學家Tswett(茨維特) 他將植物色素的石油醚提取液倒入裝有碳酸鈣的直立玻璃管,再加入石油醚使其自由流下,結果色素中各組份互相分離形成各種不同顏色的譜帶,Tswett用希臘語chroma(色)和graphos(譜)描述他的
實驗方法,即現在的Chromatography(色譜法)。
色譜法是通過是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解、分配、吸附等化學作用性能的差異,當兩相作相對運動時,使各組分在兩相中反復多次受到上述各作用力而達到相互分離,色譜法的本質是分離分析方法
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液相色譜儀是一種用液體作為流動相的色譜分離分析的方法,是基于金典色譜的理論,使用高壓泵、化學柱和固定相分離柱以及高靈敏度的檢測器,液相色譜儀和氣相色譜儀之間有什么區(qū)別呢?這里小編就來給大家介紹一下,僅供參考,希望對大家有所幫助!
液相色譜儀和氣相色譜儀之間的區(qū)別是:1、分析對象之間的區(qū)別
GC:適用于氣化程度高,熱穩(wěn)定性好,沸點低的樣品;但對于沸點高,揮發(fā)性差,熱穩(wěn)定性差,離子和高聚物的樣品,特別是對于大多數生化樣品而言,檢測不到20%的有機物質。 HPLC:適用于溶解后可制成溶液的樣品(包括有機介質溶液),它不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,它是一種分子量大,氣化困難,熱穩(wěn)定性差的生化樣品,聚合物和離子。類型樣品可用于廣泛的應用,占有機物的80%。
2、流動相位差異的差異GC:流動相是惰性的,氣體組分與流動相無親和力,僅與固定相相互作用。HPLC:流動相為液體,流動相和組分具有協同作用力,可提高色譜柱的選擇性,提高分離度,對分離起積極作用。此外,流動相有很多種,房間的選擇范圍很廣。改變流動相的極性和pH也可以調節(jié)分離。當選擇具有不同比例的兩種或更多種液體作為流動相時,可以提高分離選擇性。
3.運行條件的差異GC:變暖操作。HPLC:室溫,高壓。
使用液相色譜儀時應注意什么?更換流動相時,必須按照規(guī)定的程序進行,否則可能會出現問題,改變流動相有三種情況:互溶性的流動相的更換、無互溶性的流動相的更換和緩沖溶液的更換,在種情況下,使用準備更換的流動相*清潔吸濾器,然后打開儀器的排水閥并按下清洗按鈕清潔泵中的流動相。
將吸濾器放入新的流镲中并減慢流量。清潔幾分鐘后,關閉排水閥。接下來清潔色譜柱和檢測器池,直到基線穩(wěn)定。對于第二種情況,首先使用與新舊流動相兼容的中間清潔溶液進行清潔,然后使用新的流動相進行清潔,與種情況相同。對于第三種情況,應使用蒸餾水作為中間清潔溶液,然后使用新的流動相清洗。
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