細(xì)胞衰老是參與正常胚胎和成年生活的生物過(guò)程,并隨著年齡的增長(zhǎng)而增加。它也發(fā)生在各種疾病的機(jī)制內(nèi)和治療干預(yù)之后。衰老細(xì)胞的檢測(cè)和測(cè)量在研究和臨床實(shí)踐中至關(guān)重要且非常需要。衰老細(xì)胞存在于廣泛的年齡相關(guān)疾病中,包括癌癥。SenTraGor™是一種與偶聯(lián)的SBB類似物,與已被證明在衰老過(guò)程中積累的脂褐素顆粒發(fā)生反應(yīng)。
SenTraGor™ (GL13) 是一種用于檢測(cè)衰老的創(chuàng)新試劑。衰老細(xì)胞在正常發(fā)育、組織穩(wěn)態(tài)、衰老和廣泛的年齡相關(guān)疾病中起著重要作用。到目前為止,衰老領(lǐng)域的一個(gè)主要問(wèn)題是缺乏可靠的標(biāo)記物來(lái)特異性檢測(cè)這些細(xì)胞,尤其是原位細(xì)胞。SenTraGor™ (GL13) 是一種化的蘇丹黑 B 基化學(xué)試劑,旨在克服這一限制。
SenTraGor™ (GL13) 染色可以檢測(cè)任何生物材料中的衰老。衰老細(xì)胞的直接可視化可以在所有檔案組織標(biāo)本(福爾馬林固定石蠟包埋)和來(lái)自活檢或細(xì)胞培養(yǎng)物的細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)。
產(chǎn)品溶解
每個(gè)小瓶含有20毫克(貨號(hào):AR8850020)固體SenTraGor™化合物。要溶解化合物,分別加入3.5-3.75ml的99%乙醇,并用封口膜覆蓋。理想的濃度取決于所檢查的生物材料及其加工過(guò)程,可以按如下方式確定:從3.5ml體積的99%乙醇開始。如果觀察到試劑的非特異性(“背景")反應(yīng),則分別將體積調(diào)整為3.75ml。在56°C的水浴中孵育120分鐘,直到化合物溶解。使用前,使用13毫米過(guò)濾器和0.22μm膜用注射器過(guò)濾。
產(chǎn)品存儲(chǔ)
在室溫下儲(chǔ)存。避光。
溶解后在室溫下儲(chǔ)存,防止光線和保持密封。該試劑在室溫下溶解后可穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá) 2 個(gè)月?;蛘叻盅b,確保密封,避光并在室溫下儲(chǔ)存可長(zhǎng)達(dá)8個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)對(duì)照
a.Positive controls:
Cellular systems that can be used as positive controls are cells undergoing replicative senescence(RS), for example primary human diploid lung fibroblasts (DLFs) at late passages of division or cellsexhibiting Stress induced senescence (SISP), for example irradiated primary human DLFs, or inducibleSaos2 p21WAF1/CIP1 Tet-ON cells, when p21WAF1/CIP1 is activated. Tissues from animal modelsand human clinical cases with established senescence can serve as positive controls (examples: K-RAS induced mouse lung adenomas, irradiated human laryngeal lesions).
b.Negative controls:
Cellular systems that can be used as negative controls are early proliferative passages of primaryhuman DLFs, Saos2 p21WAF1/CIP1 Tet-ON cell when p21WAF1/CIP1 is OFF (not induced). Normal,non-aged, tissues can be used as negative controls.
c.References:
1) Evangelou K., Lougiakis N., Rizou S.V., et al. 2017. Robust, universal biomarker assay to detectsenescent cells in biological specimens. Aging Cell 16, pp 192-197.
2) Galanos P., Vougas K., WalterD., et al. 2016. Chronic p53-independent p21 expression causes genomic instability by deregulatingreplication licensing. Nat Cell Biol. 18, pp 777-89.
3) Collado M., Gil J., Efeyan A., et al. 2005. Tumourbiology: senescence in premalignant tumours. Nature. 436, pp 42.