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[動物實驗] - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)
一、項目介紹
蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics） 一詞，源于蛋白質(zhì)（Protein） 與 基因組學(xué)（Genomics） 兩個詞的組合，是大規(guī)模、高通量地研究一個細胞、組織或物種中表達的全套蛋白質(zhì)的學(xué)科。基于近年來質(zhì)譜技術(shù)的普及和發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的重要部分。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以對生物樣本中蛋白質(zhì)進行大規(guī)模鑒定和定量，進而從高通量數(shù)據(jù)中挖掘有用信息，為研究提供線索和方向。
目前蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域成熟的即為shotgun，即從樣品中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)過還原、烷基化、酶解等步驟變?yōu)殡亩位旌衔?，再?jīng)過電噴霧進入質(zhì)譜中掃描，得到質(zhì)譜圖，通過軟件和數(shù)據(jù)庫進行解析，得到相應(yīng)的蛋白質(zhì)信息。
主要設(shè)備：質(zhì)譜儀 Thermo Q Exactive / AB Secix 5600+
二、應(yīng)用
蛋白質(zhì)組學(xué)是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征，如表達水平，蛋白間互作，翻譯后修飾，從而發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育、生長期和不同生理、病理條件下的特點，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和疾病機理研究中有著重要作用。
三、樣品保存運輸
1、膠點/膠條樣本
①蛋白量大于100ng，4℃保存，冰袋運輸。
②收集時，用雙蒸水對膠塊進行清洗，采用干凈刀片將目的條帶區(qū)域（避免帶入空白或非目的區(qū)域）切下，裝入EP管中保存。
?、劭既灸z條，需要條帶肉眼清晰可見，銀染膠條不建議進行蛋白質(zhì)鑒定（銀染需質(zhì)譜兼容試劑盒銀染）。
?、懿煌瑮l帶不建議混合處理，避免干擾。
?、萏峁颖緯r需提供膠塊考染圖和樣品取點圖。
2、蛋白溶液樣本
?、俚鞍踪|(zhì)鑒定所需蛋白量至少大于10ug，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
②定量蛋白質(zhì)組學(xué)所需蛋白量大于100ug，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、坌揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)所欲蛋白量大于5mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、芙ㄗh測定蛋白濃度后，液氮速凍，避免蛋白降解，另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度，方便實驗室收到后進行后續(xù)處理。
?、輼颖救魹镮P實驗后磁珠-抗體-蛋白復(fù)合物，注意不要加入loading buffer，應(yīng)采用wash buffer清洗后，離心去掉上清，重復(fù)三次，再使用PBS沖洗磁珠三次，去上清，收集磁珠沉淀。
3、細胞樣本
?、偌毎?x107個，收集細胞沉淀，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。
4、血清樣本
①樣本量500uL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。
5、血漿樣本
?、贅颖玖?00uL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。
6、尿液樣本
?、贅颖玖?mL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
②樣品應(yīng)盡量避免帶入糞便殘渣。
7、動物組織樣本
?、贅颖玖?00mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面血液，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結(jié)冰。
?、酃潭ㄒ航葸^的樣本無法進行檢測。
8、植物組織樣本
?、贅颖玖?00mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結(jié)冰?！?br /> ?、酃潭ㄒ航葸^的樣本無法進行檢測。
9、微生物樣本
?、贅颖玖扛芍?00mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。
②收集時，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。
四、結(jié)果展示
五、價格列表
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