詳細(xì)介紹
[免疫熒光/IF] - FJB染色
染色機(jī)制
FJB染色的原理是FJB染液是一種帶熒光的物質(zhì),可以與變性的神經(jīng)元結(jié)合從而發(fā)綠色熒光,而正常神經(jīng)元不會(huì)與FJB染液結(jié)合所以不發(fā)熒光。
應(yīng)用
FJB可以與變性神經(jīng)元結(jié)合發(fā)出綠色熒光,從而可以標(biāo)記神經(jīng)組織內(nèi)的變性壞死神經(jīng)元。可以借此研究不同處理方法對(duì)神經(jīng)組織的損傷。
染液配制
純水配成5mg/ml的濃縮液,用時(shí)0.1%的冰醋酸做溶劑,1:50-1:100稀釋
染色方法
1、石蠟切片脫蠟至水。
2、用現(xiàn)配的0.1%冰醋酸做溶劑,按1:50-1:100配制FJB的工作液,混勻,滴加到組織上室溫孵育20min;
3、純水沖洗,DAPI染核,再用PBS沖洗;
4、吹風(fēng)機(jī)吹干,二甲苯透明2min,加一滴中性樹脂封片,晾干。
染色結(jié)果
壞死神經(jīng)元胞漿和胞核呈綠色熒光,正常神經(jīng)元無著色。神經(jīng)元著色有時(shí)候伴隨著腦梗,在梗死附近著色較明顯。
注意事項(xiàng)
1、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要現(xiàn)配現(xiàn)用。
2、所有染色步驟完成后,切片要自然晾干或用吹風(fēng)機(jī)低檔吹干,然后透明,樹膠封片,因?yàn)橐呀Y(jié)合的FJB可溶于甘油,酒精,所以不能直接用熒光封片劑封片,也不能在酒精中做脫水處理。
3、FJB與組織的結(jié)合可逆,因此做完后要盡快鏡檢拍照,避免熒光淬滅。
[免疫熒光/IF] - FJB染色
上海茁彩生物科技有限公司,可以承接諸多病理實(shí)驗(yàn),樣本不僅含有基礎(chǔ)的動(dòng)物組織切片,還包括植物葉片、動(dòng)物細(xì)胞、骨片、腦片、皮膚等特殊樣本。染色種類多,染色方法全.石蠟染色,冰切染色均可操作,同時(shí)還可以承接整體實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,包括樣本的造模,細(xì)胞的培養(yǎng),以及后續(xù)細(xì)胞的增殖、細(xì)胞粘附、細(xì)胞劃痕等實(shí)驗(yàn)